鹿（Deer）孕酮（PROG）ELISA检测试剂盒本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被孕酮（PROG）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成＊终的黄色。颜色的深浅和样品中的孕酮（PROG）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。样品收集、处理及保存方法1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品1. 酶标仪（450nm）2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱操作注意事项1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，＊终结果乘以5才是样本实际浓度。4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5. 所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、3、6、12、24、48 ng/mL试剂的准备 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法1. 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。2. 自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。操作步骤1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；3. 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断 绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。 试剂盒性能1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。2. 灵敏度：＊低检测浓度小于1.0 ng/mL。3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。6. 有效期：6个月免责声明1. 试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。2. 严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。 FOR RESEARCH USE ONLY. NOT FOR USE IN DIAGNOSTIC PROCEDURES. Deer Progesterone (PROG) ELISA Kit instruction Intended useThis PROG ELISA kit is intended Laboratory for Research use only and is not for use in diagnostic or therapeutic procedures.The Stop Solution changes the color from blue to yellow and the intensity of the color is measured at 450 nm using a spectrophotometer. In order to measure the concentration of PROG in the sample, this PROG ELISA Kit includes a set of calibration standards. The calibration standards are assayed at the same time as the samples and allow the operator to produce a standard curve of Optical Density versus PROG concentration. The concentration of PROG in the samples is then determined by comparing the O.D. of the samples to the standard curve.Sample collection and storagesSerum - Use a serum separator tube and allow samples to clot for 30 minutes before centrifugation for 10 minutes at approximately 3000×g. Remove serum and assay immediately or aliquot and store samples at -20℃ or -80℃.Avoid repeated freeze-thaw cyclesPlasma - Collect plasma using EDTA or heparin as an anticoagulant. Centrifuge samples for 30 minutes at 3000×g at 2-8℃ within 30 minutes of collection. Store samples at -20℃or -80℃. Avoid repeated freeze-thaw cycles.Cell culture supernates and other biological fluids - Remove particulates by centrifugation and assay immediately or aliquot and store samples at -20℃or -80℃. Avoid repeated freeze-thaw cycles.Note: The samples shoule be centrifugated dequately and no hemolysis or granule was allowed.Materials required but not supplied1. Standard microplate reader(450nm)2. Precision pipettes and Disposable pipette tips.3. 37 ℃ incubatorPrecautions1. Do not substitute reagents from one kit to another. Standard, conjugate and microplates are matched for optimal performance. Use only the reagents supplied by manufacturer.2. Do not remove microplate from the storage bag until needed. Unused strips should be stored at 2-8°C in their pouch with the desiccant provided.3. Mix all reagents before using.Remove all kit reagents from refrigerator and allow them to reach room temperature ( 20-25°C)Materials suppliedName96 determinations48 determinationsMicroelisa stripplate12*8strips12*4stripsStandard0.3ml*6tubes0.3ml*6tubesSample Diluent6.0ml3.0mlHRP-Conjugate reagent10.0ml5.0ml20X Wash solution25ml15mlChromogen Solution A6.0ml3.0mlChromogen Solution B6.0ml3.0mlStop Solution6.0ml3.0mlClosure plate membrane22User manual11Sealed bags11Note: Standard (S0 → S5) concentration was followed by:0,3,6,12,24,48 ng/mlReagent preparation20×wash solution:Dilute with Distilled or deionized water 1:20.Assay procedure1. Prepare all reagents before starting assay procedure. It is recommended that all Standards and Samples be added in duplicate to the Microelisa Stripplate.2. Add standard: Set Standard wells, testing sample wells. Add standard 50μl to standard well.3. Add Sample: Add testing sample 10μl then add Sample Diluent 40μl to testing sample well; Blank well doesn’t add anyting.4. Add 100μl of HRP-conjugate reagent to each well, cover with an adhesive strip and incubate for 60 minutes at 37°C. 5. Aspirate each well and wash, repeating the process four times for a total of five washes. Wash by filling each well with Wash Solution (400μl) using a squirt bottle, manifold dispenser or autowasher. Complete removal of liquid at each step is essential to good performance. After the last wash, remove any remaining Wash Solution by aspirating or decanting. Invert the plate and blot it against clean paper towels.6. Add chromogen solution A 50μl and chromogen solution B 50μl to each well. Gently mix and incubate for 15 minutes at 37°C. Protect from light.7. Add 50μl Stop Solution to each well. The color in the wells should change from blue to yellow. If the color in the wells is green or the color change does not appear uniform, gently tap the plate to ensure thorough mixing.8. Read the Optical Density (O.D.) at 450 nm using a microtiter plate reader within 15 minutes.Calculation of results1. This standard curve is used to determine the amount in an unknown sample. The standard curve is generated by plotting the average O.D. (450 nm) obtained for each of the six standard concentrations on the vertical (Y) axis versus the corresponding concentration on the horizontal (X) axis. 2. First, calculate the mean O.D. value for each standard and sample. All O.D. values, are subtracted by the mean value of the zero standard before result interpretation. Construct the standard curve using graph paper or statistical software. 3. To determine the amount in each sample, first locate the O.D. value on the Y-axis and extend a horizontal line to the standard curve. At the point of intersection, draw a vertical line to the X-axis and read the corresponding concentration. 4. Any variation in operator, pipetting and washing technique, incubation time or temperature, and kit age can cause variation in result. Each user should obtain their own standard curve.5. The sensitivity by this assay is 1.0 ng/ml6. Standard curve Storage： 2-8℃.validity： six months. FOR RESEARCH USE ONLY; NOT FOR THERAPEUTIC OR DIAGNOSTIC APPLICATIONS! PLEASE READ THROUGH ENTIRE PROCEDURE BEFORE BEGINNING!
抗凝山羊血（无菌 瓶装）200ml 注意事项: 尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。 如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。 染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。 如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。 荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。 用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。 需自备PBS。 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。操作步骤(仅供参考):1、贴壁细胞的消化①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。②加入少量 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。鉴别方法： 血液凝结析出的淡黄色通明液体。如将血液自血管内抽出，放入试管中，不加抗凝剂，则凝血反响被激活，血液敏捷凝结，构成胶冻。其周围所析出之淡黄色通明液体即为血清，也可于凝血后经离心获得。在凝血过程中，纤维蛋白原转成为纤维蛋白块，所以血清中无纤维蛋白原，这一点是与血浆zui大的差异。而在凝血反响中，血小板开释出很多物质，各也都发生了改变。 这些成分都留在血清中并持续发生改变，如原成为，并随血清寄存时刻逐步削减以致不见。这些也都是与血浆差异的地方。但很多未参与凝血反响的物质则与血浆根本一样。为防止抗凝剂的搅扰，血液中很多化学成分的剖析，都以血清为样品。血清保存应该注意以下几点：(1)需要长期保存的血清必须储存于-20℃-70℃低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂.(2)热灭活是指56℃,30分钟加热已*解冻的血清.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量.补体参与反应有:细胞毒作用,平滑肌细胞收缩,肥大细胞和血小板释放组胺,增强吞噬作用,促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化.(3)瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃至-70℃低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀.(4)一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清.(5)血清中的沉淀物絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理.显微镜下小黑点:经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多.有些沉淀物在显微镜下观察象小黑点,常误认为血清受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清.(6)切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破会而影响血清质量.抗凝山羊血（无菌 袋装） 用法 血清由冰冻状态在常温下完全融化成液体,摇均匀后放置 10-30 分钟待结块蛋白质沉底后即可使用。注意事项 有少量蛋白质结块析出不影响使用。未融化或融化未经摇匀的血清禁止直接放入高温水浴内加温。减少血清重复冻融。血清在室温或 4 ℃ 冰箱内放置过久会影响促细胞生长效果。解冻 将血清从冰冻区中取出后(切勿直接将血清从 -20 ℃ 进入 37 ℃ 解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀),先置于 2 ~ 8 ℃ 区域中使之融化,然后在室温下使之全融。使用前再预温到将使用的温度(如 37 ℃ ),但必须注意的是,解冻过程中应轻轻地摇晃均匀。血清在解冻过程中可能会出现少量絮状或片状析出物,主要是血清中脂蛋白的变性或是纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)析出,但这些析出物,并不影响血清本身的质量。 若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。细胞培养的优点:1.研究的对象是活细胞在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。2.研究条件可以人为控制pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。3.研究的样本可以达到比较均一性通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。4.研究内容便于观察、检测和记录采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。质量标准血清质量高低取决于两方面因素：一是取材对象，二是取材过程。用于取材的动物应健康无病并且在指定的出生天数之内，取材过程应严格按照操作规程执行，制备出的血清要经过严格的质量鉴定。1． 牛血清必须来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家。并应具备适当的监测系统。2． 有些国家还要求牛血清来自未用过反刍动物蛋白饲料的牛群。3． 证明所用牛血清中不含对所生产疫苗病毒的抑制物。4． 血清要通过滤膜过滤除菌，保证无菌。5． 无细菌、霉菌、支原体和病毒的污染，有些国家要求无细菌噬菌体污染。6． 对细胞有良好的支持繁殖作用
抗凝山羊血（无菌 瓶装）500ml 注意事项: 尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。 如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。 染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。 如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。 荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。 用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。 需自备PBS。 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。操作步骤(仅供参考):1、贴壁细胞的消化①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。②加入少量 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。鉴别方法： 血液凝结析出的淡黄色通明液体。如将血液自血管内抽出，放入试管中，不加抗凝剂，则凝血反响被激活，血液敏捷凝结，构成胶冻。其周围所析出之淡黄色通明液体即为血清，也可于凝血后经离心获得。在凝血过程中，纤维蛋白原转成为纤维蛋白块，所以血清中无纤维蛋白原，这一点是与血浆zui大的差异。而在凝血反响中，血小板开释出很多物质，各也都发生了改变。 这些成分都留在血清中并持续发生改变，如原成为，并随血清寄存时刻逐步削减以致不见。这些也都是与血浆差异的地方。但很多未参与凝血反响的物质则与血浆根本一样。为防止抗凝剂的搅扰，血液中很多化学成分的剖析，都以血清为样品。血清保存应该注意以下几点：(1)需要长期保存的血清必须储存于-20℃-70℃低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂.(2)热灭活是指56℃,30分钟加热已*解冻的血清.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量.补体参与反应有:细胞毒作用,平滑肌细胞收缩,肥大细胞和血小板释放组胺,增强吞噬作用,促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化.(3)瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃至-70℃低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀.(4)一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清.(5)血清中的沉淀物絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理.显微镜下小黑点:经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多.有些沉淀物在显微镜下观察象小黑点,常误认为血清受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清.(6)切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破会而影响血清质量.抗凝山羊血（无菌 袋装） 用法 血清由冰冻状态在常温下完全融化成液体,摇均匀后放置 10-30 分钟待结块蛋白质沉底后即可使用。注意事项 有少量蛋白质结块析出不影响使用。未融化或融化未经摇匀的血清禁止直接放入高温水浴内加温。减少血清重复冻融。血清在室温或 4 ℃ 冰箱内放置过久会影响促细胞生长效果。解冻 将血清从冰冻区中取出后(切勿直接将血清从 -20 ℃ 进入 37 ℃ 解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀),先置于 2 ~ 8 ℃ 区域中使之融化,然后在室温下使之全融。使用前再预温到将使用的温度(如 37 ℃ ),但必须注意的是,解冻过程中应轻轻地摇晃均匀。血清在解冻过程中可能会出现少量絮状或片状析出物,主要是血清中脂蛋白的变性或是纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)析出,但这些析出物,并不影响血清本身的质量。 若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。细胞培养的优点:1.研究的对象是活细胞在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。2.研究条件可以人为控制pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。3.研究的样本可以达到比较均一性通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。4.研究内容便于观察、检测和记录采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。质量标准血清质量高低取决于两方面因素：一是取材对象，二是取材过程。用于取材的动物应健康无病并且在指定的出生天数之内，取材过程应严格按照操作规程执行，制备出的血清要经过严格的质量鉴定。1． 牛血清必须来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家。并应具备适当的监测系统。2． 有些国家还要求牛血清来自未用过反刍动物蛋白饲料的牛群。3． 证明所用牛血清中不含对所生产疫苗病毒的抑制物。4． 血清要通过滤膜过滤除菌，保证无菌。5． 无细菌、霉菌、支原体和病毒的污染，有些国家要求无细菌噬菌体污染。6． 对细胞有良好的支持繁殖作用
抗凝山羊血（无菌 袋装）500ml 注意事项: 尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。 如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。 染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。 如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。 荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。 用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。 需自备PBS。 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。操作步骤(仅供参考):1、贴壁细胞的消化①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。②加入少量 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。鉴别方法： 血液凝结析出的淡黄色通明液体。如将血液自血管内抽出，放入试管中，不加抗凝剂，则凝血反响被激活，血液敏捷凝结，构成胶冻。其周围所析出之淡黄色通明液体即为血清，也可于凝血后经离心获得。在凝血过程中，纤维蛋白原转成为纤维蛋白块，所以血清中无纤维蛋白原，这一点是与血浆zui大的差异。而在凝血反响中，血小板开释出很多物质，各也都发生了改变。 这些成分都留在血清中并持续发生改变，如原成为，并随血清寄存时刻逐步削减以致不见。这些也都是与血浆差异的地方。但很多未参与凝血反响的物质则与血浆根本一样。为防止抗凝剂的搅扰，血液中很多化学成分的剖析，都以血清为样品。血清保存应该注意以下几点：(1)需要长期保存的血清必须储存于-20℃-70℃低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂.(2)热灭活是指56℃,30分钟加热已*解冻的血清.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量.补体参与反应有:细胞毒作用,平滑肌细胞收缩,肥大细胞和血小板释放组胺,增强吞噬作用,促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化.(3)瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃至-70℃低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀.(4)一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清.(5)血清中的沉淀物絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理.显微镜下小黑点:经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多.有些沉淀物在显微镜下观察象小黑点,常误认为血清受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清.(6)切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破会而影响血清质量.抗凝山羊血（无菌 袋装） 用法 血清由冰冻状态在常温下完全融化成液体,摇均匀后放置 10-30 分钟待结块蛋白质沉底后即可使用。注意事项 有少量蛋白质结块析出不影响使用。未融化或融化未经摇匀的血清禁止直接放入高温水浴内加温。减少血清重复冻融。血清在室温或 4 ℃ 冰箱内放置过久会影响促细胞生长效果。解冻 将血清从冰冻区中取出后(切勿直接将血清从 -20 ℃ 进入 37 ℃ 解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀),先置于 2 ~ 8 ℃ 区域中使之融化,然后在室温下使之全融。使用前再预温到将使用的温度(如 37 ℃ ),但必须注意的是,解冻过程中应轻轻地摇晃均匀。血清在解冻过程中可能会出现少量絮状或片状析出物,主要是血清中脂蛋白的变性或是纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)析出,但这些析出物,并不影响血清本身的质量。 若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。细胞培养的优点:1.研究的对象是活细胞在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。2.研究条件可以人为控制pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。3.研究的样本可以达到比较均一性通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。4.研究内容便于观察、检测和记录采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。质量标准血清质量高低取决于两方面因素：一是取材对象，二是取材过程。用于取材的动物应健康无病并且在指定的出生天数之内，取材过程应严格按照操作规程执行，制备出的血清要经过严格的质量鉴定。1． 牛血清必须来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家。并应具备适当的监测系统。2． 有些国家还要求牛血清来自未用过反刍动物蛋白饲料的牛群。3． 证明所用牛血清中不含对所生产疫苗病毒的抑制物。4． 血清要通过滤膜过滤除菌，保证无菌。5． 无细菌、霉菌、支原体和病毒的污染，有些国家要求无细菌噬菌体污染。6． 对细胞有良好的支持繁殖作用
抗凝山羊血（无菌 袋装）1000ml 注意事项: 尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。 如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。 染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。 如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。 荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。 用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。 需自备PBS。 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。操作步骤(仅供参考):1、贴壁细胞的消化①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。②加入少量 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。鉴别方法： 血液凝结析出的淡黄色通明液体。如将血液自血管内抽出，放入试管中，不加抗凝剂，则凝血反响被激活，血液敏捷凝结，构成胶冻。其周围所析出之淡黄色通明液体即为血清，也可于凝血后经离心获得。在凝血过程中，纤维蛋白原转成为纤维蛋白块，所以血清中无纤维蛋白原，这一点是与血浆zui大的差异。而在凝血反响中，血小板开释出很多物质，各也都发生了改变。 这些成分都留在血清中并持续发生改变，如原成为，并随血清寄存时刻逐步削减以致不见。这些也都是与血浆差异的地方。但很多未参与凝血反响的物质则与血浆根本一样。为防止抗凝剂的搅扰，血液中很多化学成分的剖析，都以血清为样品。血清保存应该注意以下几点：(1)需要长期保存的血清必须储存于-20℃-70℃低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂.(2)热灭活是指56℃,30分钟加热已*解冻的血清.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量.补体参与反应有:细胞毒作用,平滑肌细胞收缩,肥大细胞和血小板释放组胺,增强吞噬作用,促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化.(3)瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃至-70℃低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀.(4)一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清.(5)血清中的沉淀物絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理.显微镜下小黑点:经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多.有些沉淀物在显微镜下观察象小黑点,常误认为血清受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清.(6)切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破会而影响血清质量.抗凝山羊血（无菌 袋装） 用法 血清由冰冻状态在常温下完全融化成液体,摇均匀后放置 10-30 分钟待结块蛋白质沉底后即可使用。注意事项 有少量蛋白质结块析出不影响使用。未融化或融化未经摇匀的血清禁止直接放入高温水浴内加温。减少血清重复冻融。血清在室温或 4 ℃ 冰箱内放置过久会影响促细胞生长效果。解冻 将血清从冰冻区中取出后(切勿直接将血清从 -20 ℃ 进入 37 ℃ 解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀),先置于 2 ~ 8 ℃ 区域中使之融化,然后在室温下使之全融。使用前再预温到将使用的温度(如 37 ℃ ),但必须注意的是,解冻过程中应轻轻地摇晃均匀。血清在解冻过程中可能会出现少量絮状或片状析出物,主要是血清中脂蛋白的变性或是纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)析出,但这些析出物,并不影响血清本身的质量。 若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。细胞培养的优点:1.研究的对象是活细胞在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。2.研究条件可以人为控制pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。3.研究的样本可以达到比较均一性通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。4.研究内容便于观察、检测和记录采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。质量标准血清质量高低取决于两方面因素：一是取材对象，二是取材过程。用于取材的动物应健康无病并且在指定的出生天数之内，取材过程应严格按照操作规程执行，制备出的血清要经过严格的质量鉴定。1． 牛血清必须来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家。并应具备适当的监测系统。2． 有些国家还要求牛血清来自未用过反刍动物蛋白饲料的牛群。3． 证明所用牛血清中不含对所生产疫苗病毒的抑制物。4． 血清要通过滤膜过滤除菌，保证无菌。5． 无细菌、霉菌、支原体和病毒的污染，有些国家要求无细菌噬菌体污染。6． 对细胞有良好的支持繁殖作用
抗凝绵羊血（无菌 瓶装）100ml抗凝绵羊血是一种常用于科研实验的生物样本，以下是其详细介绍：制备采血：通常采用无菌颈静脉采血法，确保采集过程中不被微生物污染，以获取足够量的新鲜绵羊血。抗凝处理：将采集到的绵羊血与抗凝剂按适当比例在无菌容器中混合。常用的抗凝剂有柠檬酸钠、EDTA、肝素、阿氏液等。例如，柠檬酸钠通过与血液中的钙离子形成可溶性螯合物，降低钙离子浓度，阻止血液凝固；EDTA 能螯合血液中的钙离子，从而阻止凝血因子的激活；肝素则是通过增强抗凝血酶 Ⅲ 的活性，抑制凝血酶的形成和活性来实现抗凝。保存应保存在 2 - 8℃的环境下，严禁冷冻。在保存过程中，每 1 - 2 天应颠倒混匀一次，以避免细胞长时间沉积缺乏营养。如果是需要长期保存的抗凝绵羊血血清，可在分离出血清后，将其储存于 - 20℃或以下的低温环境，但要尽可能减少冻融循环次数。规格常见的规格有 100ml / 瓶，也有 50ml / 瓶、500ml / 瓶、1000ml / 瓶等不同规格，以满足不同科研和实验的需求。用途主要用于科研、教学实验。例如在细胞培养中，作为补充剂提供细胞生长所需的营养成分。也可用于血液培养基、血平板的配制，以及在免疫学、血液学、生物化学等方面的检测和实验中，用于观察和分析药物对绵羊生理和生化指标的影响，或者检测抗体、抗原、酶等物质的反应。注意事项采集、处理和使用过程中要严格遵循无菌操作原则，防止细菌、真菌等微生物污染，以免影响实验结果。使用时应注意其有效期和保存条件，不同抗凝剂适用于不同的检测项目，需根据具体实验要求选择合适的抗凝剂。例如，进行血常规检查时，常使用 EDTA 抗凝绵羊血；而用于凝血功能检测，则多选择柠檬酸钠抗凝绵羊血。避免超长时间超远距离运输，防止血液因颠簸、温度变化等因素影响质量。
抗凝绵羊血（无菌 瓶装）200ml抗凝绵羊血是一种常用于科研实验的生物样本，以下是其详细介绍：制备采血：通常采用无菌颈静脉采血法，确保采集过程中不被微生物污染，以获取足够量的新鲜绵羊血。抗凝处理：将采集到的绵羊血与抗凝剂按适当比例在无菌容器中混合。常用的抗凝剂有柠檬酸钠、EDTA、肝素、阿氏液等。例如，柠檬酸钠通过与血液中的钙离子形成可溶性螯合物，降低钙离子浓度，阻止血液凝固；EDTA 能螯合血液中的钙离子，从而阻止凝血因子的激活；肝素则是通过增强抗凝血酶 Ⅲ 的活性，抑制凝血酶的形成和活性来实现抗凝。保存应保存在 2 - 8℃的环境下，严禁冷冻。在保存过程中，每 1 - 2 天应颠倒混匀一次，以避免细胞长时间沉积缺乏营养。如果是需要长期保存的抗凝绵羊血血清，可在分离出血清后，将其储存于 - 20℃或以下的低温环境，但要尽可能减少冻融循环次数。规格常见的规格有 100ml / 瓶，也有 50ml / 瓶、500ml / 瓶、1000ml / 瓶等不同规格，以满足不同科研和实验的需求。用途主要用于科研、教学实验。例如在细胞培养中，作为补充剂提供细胞生长所需的营养成分。也可用于血液培养基、血平板的配制，以及在免疫学、血液学、生物化学等方面的检测和实验中，用于观察和分析药物对绵羊生理和生化指标的影响，或者检测抗体、抗原、酶等物质的反应。注意事项采集、处理和使用过程中要严格遵循无菌操作原则，防止细菌、真菌等微生物污染，以免影响实验结果。使用时应注意其有效期和保存条件，不同抗凝剂适用于不同的检测项目，需根据具体实验要求选择合适的抗凝剂。例如，进行血常规检查时，常使用 EDTA 抗凝绵羊血；而用于凝血功能检测，则多选择柠檬酸钠抗凝绵羊血。避免超长时间超远距离运输，防止血液因颠簸、温度变化等因素影响质量。
抗凝绵羊血（无菌 瓶装）500ml抗凝绵羊血是一种常用于科研实验的生物样本，以下是其详细介绍：制备采血：通常采用无菌颈静脉采血法，确保采集过程中不被微生物污染，以获取足够量的新鲜绵羊血。抗凝处理：将采集到的绵羊血与抗凝剂按适当比例在无菌容器中混合。常用的抗凝剂有柠檬酸钠、EDTA、肝素、阿氏液等。例如，柠檬酸钠通过与血液中的钙离子形成可溶性螯合物，降低钙离子浓度，阻止血液凝固；EDTA 能螯合血液中的钙离子，从而阻止凝血因子的激活；肝素则是通过增强抗凝血酶 Ⅲ 的活性，抑制凝血酶的形成和活性来实现抗凝。保存应保存在 2 - 8℃的环境下，严禁冷冻。在保存过程中，每 1 - 2 天应颠倒混匀一次，以避免细胞长时间沉积缺乏营养。如果是需要长期保存的抗凝绵羊血血清，可在分离出血清后，将其储存于 - 20℃或以下的低温环境，但要尽可能减少冻融循环次数。规格常见的规格有 100ml / 瓶，也有 50ml / 瓶、500ml / 瓶、1000ml / 瓶等不同规格，以满足不同科研和实验的需求。用途主要用于科研、教学实验。例如在细胞培养中，作为补充剂提供细胞生长所需的营养成分。也可用于血液培养基、血平板的配制，以及在免疫学、血液学、生物化学等方面的检测和实验中，用于观察和分析药物对绵羊生理和生化指标的影响，或者检测抗体、抗原、酶等物质的反应。注意事项采集、处理和使用过程中要严格遵循无菌操作原则，防止细菌、真菌等微生物污染，以免影响实验结果。使用时应注意其有效期和保存条件，不同抗凝剂适用于不同的检测项目，需根据具体实验要求选择合适的抗凝剂。例如，进行血常规检查时，常使用 EDTA 抗凝绵羊血；而用于凝血功能检测，则多选择柠檬酸钠抗凝绵羊血。避免超长时间超远距离运输，防止血液因颠簸、温度变化等因素影响质量。
抗凝绵羊血（无菌 袋装）500ml注意事项: 尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。 如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。 染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。 如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。 荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。 用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。 需自备PBS。 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。操作步骤(仅供参考):1、贴壁细胞的消化①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。②加入少量 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。鉴别方法： 血液凝结析出的淡黄色通明液体。如将血液自血管内抽出，放入试管中，不加抗凝剂，则凝血反响被激活，血液敏捷凝结，构成胶冻。其周围所析出之淡黄色通明液体即为血清，也可于凝血后经离心获得。在凝血过程中，纤维蛋白原转成为纤维蛋白块，所以血清中无纤维蛋白原，这一点是与血浆zui大的差异。而在凝血反响中，血小板开释出很多物质，各也都发生了改变。 这些成分都留在血清中并持续发生改变，如原成为，并随血清寄存时刻逐步削减以致不见。这些也都是与血浆差异的地方。但很多未参与凝血反响的物质则与血浆根本一样。为防止抗凝剂的搅扰，血液中很多化学成分的剖析，都以血清为样品。血清保存应该注意以下几点：(1)需要长期保存的血清必须储存于-20℃-70℃低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂.(2)热灭活是指56℃,30分钟加热已*解冻的血清.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量.补体参与反应有:细胞毒作用,平滑肌细胞收缩,肥大细胞和血小板释放组胺,增强吞噬作用,促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化.(3)瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃至-70℃低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀.(4)一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清.(5)血清中的沉淀物絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理.显微镜下小黑点:经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多.有些沉淀物在显微镜下观察象小黑点,常误认为血清受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清.(6)切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破会而影响血清质量.抗凝绵羊血（无菌 袋装） 用法 血清由冰冻状态在常温下完全融化成液体,摇均匀后放置 10-30 分钟待结块蛋白质沉底后即可使用。注意事项 有少量蛋白质结块析出不影响使用。未融化或融化未经摇匀的血清禁止直接放入高温水浴内加温。减少血清重复冻融。血清在室温或 4 ℃ 冰箱内放置过久会影响促细胞生长效果。解冻 将血清从冰冻区中取出后(切勿直接将血清从 -20 ℃ 进入 37 ℃ 解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀),先置于 2 ~ 8 ℃ 区域中使之融化,然后在室温下使之全融。使用前再预温到将使用的温度(如 37 ℃ ),但必须注意的是,解冻过程中应轻轻地摇晃均匀。血清在解冻过程中可能会出现少量絮状或片状析出物,主要是血清中脂蛋白的变性或是纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)析出,但这些析出物,并不影响血清本身的质量。 若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。细胞培养的优点:1.研究的对象是活细胞在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。2.研究条件可以人为控制pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。3.研究的样本可以达到比较均一性通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。4.研究内容便于观察、检测和记录采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。质量标准血清质量高低取决于两方面因素：一是取材对象，二是取材过程。用于取材的动物应健康无病并且在指定的出生天数之内，取材过程应严格按照操作规程执行，制备出的血清要经过严格的质量鉴定。1． 牛血清必须来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家。并应具备适当的监测系统。2． 有些国家还要求牛血清来自未用过反刍动物蛋白饲料的牛群。3． 证明所用牛血清中不含对所生产疫苗病毒的抑制物。4． 血清要通过滤膜过滤除菌，保证无菌。5． 无细菌、霉菌、支原体和病毒的污染，有些国家要求无细菌噬菌体污染。6． 对细胞有良好的支持繁殖作用
抗凝绵羊血（无菌 袋装）1000ml注意事项: 尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。 如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。 染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。 如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。 荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。 用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。 需自备PBS。 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。操作步骤(仅供参考):1、贴壁细胞的消化①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。②加入少量 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。鉴别方法： 血液凝结析出的淡黄色通明液体。如将血液自血管内抽出，放入试管中，不加抗凝剂，则凝血反响被激活，血液敏捷凝结，构成胶冻。其周围所析出之淡黄色通明液体即为血清，也可于凝血后经离心获得。在凝血过程中，纤维蛋白原转成为纤维蛋白块，所以血清中无纤维蛋白原，这一点是与血浆zui大的差异。而在凝血反响中，血小板开释出很多物质，各也都发生了改变。 这些成分都留在血清中并持续发生改变，如原成为，并随血清寄存时刻逐步削减以致不见。这些也都是与血浆差异的地方。但很多未参与凝血反响的物质则与血浆根本一样。为防止抗凝剂的搅扰，血液中很多化学成分的剖析，都以血清为样品。血清保存应该注意以下几点：(1)需要长期保存的血清必须储存于-20℃-70℃低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂.(2)热灭活是指56℃,30分钟加热已*解冻的血清.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量.补体参与反应有:细胞毒作用,平滑肌细胞收缩,肥大细胞和血小板释放组胺,增强吞噬作用,促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化.(3)瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃至-70℃低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀.(4)一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清.(5)血清中的沉淀物絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理.显微镜下小黑点:经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多.有些沉淀物在显微镜下观察象小黑点,常误认为血清受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清.(6)切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破会而影响血清质量.抗凝绵羊血（无菌 袋装） 用法 血清由冰冻状态在常温下完全融化成液体,摇均匀后放置 10-30 分钟待结块蛋白质沉底后即可使用。注意事项 有少量蛋白质结块析出不影响使用。未融化或融化未经摇匀的血清禁止直接放入高温水浴内加温。减少血清重复冻融。血清在室温或 4 ℃ 冰箱内放置过久会影响促细胞生长效果。解冻 将血清从冰冻区中取出后(切勿直接将血清从 -20 ℃ 进入 37 ℃ 解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀),先置于 2 ~ 8 ℃ 区域中使之融化,然后在室温下使之全融。使用前再预温到将使用的温度(如 37 ℃ ),但必须注意的是,解冻过程中应轻轻地摇晃均匀。血清在解冻过程中可能会出现少量絮状或片状析出物,主要是血清中脂蛋白的变性或是纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)析出,但这些析出物,并不影响血清本身的质量。 若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。细胞培养的优点:1.研究的对象是活细胞在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。2.研究条件可以人为控制pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。3.研究的样本可以达到比较均一性通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。4.研究内容便于观察、检测和记录采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。质量标准血清质量高低取决于两方面因素：一是取材对象，二是取材过程。用于取材的动物应健康无病并且在指定的出生天数之内，取材过程应严格按照操作规程执行，制备出的血清要经过严格的质量鉴定。1． 牛血清必须来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家。并应具备适当的监测系统。2． 有些国家还要求牛血清来自未用过反刍动物蛋白饲料的牛群。3． 证明所用牛血清中不含对所生产疫苗病毒的抑制物。4． 血清要通过滤膜过滤除菌，保证无菌。5． 无细菌、霉菌、支原体和病毒的污染，有些国家要求无细菌噬菌体污染。6． 对细胞有良好的支持繁殖作用
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