小鼠(Mouse)多药耐药关联蛋白4(MRP4)ELISA检测试剂盒本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被多药耐药关联蛋白4(MRP4)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的多药耐药关联蛋白4(MRP4)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。样品收集、处理及保存方法1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品1. 酶标仪(450nm)2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱操作注意事项1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,*终结果乘以5才是样本实际浓度。4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5. 所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、0.75、1.5、3、6、12 ng/mL试剂的准备 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。操作步骤1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断 绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。 试剂盒性能1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。2. 灵敏度:*低检测浓度小于0.1 ng/mL。3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。6. 有效期:6个月免责声明1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
小鼠(Mouse)有机阴离子转运蛋白3(OAT3)ELISA检测试剂盒本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有机阴离子转运蛋白3(OAT3)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的有机阴离子转运蛋白3(OAT3)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。样品收集、处理及保存方法1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品1. 酶标仪(450nm)2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱操作注意事项1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,*终结果乘以5才是样本实际浓度。4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5. 所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、7.5、15、30、60、120 ng/mL试剂的准备 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。操作步骤1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。 4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断 绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。 试剂盒性能1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。2. 灵敏度:*低检测浓度小于1.0 ng/mL。3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。6. 有效期:6个月免责声明1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
小鼠(Mouse)尿酸盐转运蛋白1(URAT1)ELISA检测试剂盒本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被尿酸盐转运蛋白1(URAT1)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的尿酸盐转运蛋白1(URAT1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品活性。样品收集、处理及保存方法1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品1. 酶标仪(450nm)2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱操作注意事项1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,*终结果乘以5才是样本实际浓度。4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5. 所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、12.5、25、50、100、200 ng/mL试剂的准备 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。操作步骤1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。 4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断 绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。 试剂盒性能1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。2. 灵敏度:*低检测浓度小于0.5 ng/mL。3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。6. 有效期:6个月免责声明1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
抗凝牛血(无菌 袋装)2000ml抗凝牛血(无菌袋装)是一种通过无菌采集牛血,并添加抗凝剂处理后用袋装形式包装的产品,以下是相关介绍:制备:通常采用无菌颈动脉采血方式,采集后进行抗凝处理并分装到无菌袋中。抗凝剂类型及原理:常见的抗凝剂有柠檬酸钠、EDTA、肝素等。柠檬酸钠(枸橼酸钠)通过与血液中的钙离子结合,形成难以解离的可溶性络合物,使血液中钙离子浓度降低,从而阻止血液凝固,常用浓度为 3.8%,血液与抗凝剂体积比一般为 9:1。EDTA 则是与血液中的钙离子形成稳定的螯合物,去除钙离子而实现抗凝。肝素能增强抗凝血酶 Ⅲ 的活性,加速对凝血因子的灭活,从而发挥抗凝作用。储存条件:一般需在 2-8℃的低温环境下保存,严禁冷冻,并且每 1-2 天要颠倒混匀一次,避免细胞长时间沉积缺乏营养。有效期:使用柠檬酸钠等抗凝的牛血,在上述保存条件下,有效期通常为 3-4 周。用途:主要用于科研、教学实验,如作为血液培养基、血平板配制的原料,也可作为血液浓缩器试验液等。在购买和使用抗凝牛血(无菌袋装)时,要选择正规的供应商,确保产品质量和无菌性。使用过程中需严格遵守无菌操作规范,避免污染,以保证实验结果的准确性。
小鼠血清(无菌过滤)500ml血清使用注意事项:防止发病免疫血清多用马、牛血液制备,马、牛血清对其它动物来说,也具有抗原性,有引起血清病的可能,因此,使用免疫血清要注意防止引起血清病,预防的主要措施是使用提纯的制品,不用不合格的产品;另外,不要有急功近利的想法,要按照要求剂量使用,一次用量不可过大。大鼠小鼠取血操作步骤:1.剪尾采血 小鼠每次采血量0.1ml,大鼠每次采血量0.3-0.5ml左手拇指和食指从背部捉住鼠颈部皮肤,将鼠头朝下,鼠保定后将其尾巴置于50℃热水中浸泡数分钟,使尾部血管充盈。擦干尾部,再用剪刀或刀片剪去尾尖1-2mm,用试管接流出的血液,同时自尾根部向尾尖按-摩。取血后用棉球压榨止血并用6%液体火棉胶涂在伤口处止血。 2.去除眼球采血小鼠采血量0.5-1ml左手捉住小鼠颈部皮肤,轻压在实验台上,取侧卧位,左手食指尽量将小鼠眼周皮肤往颈后压,使眼球杰出。用眼科弯镊迅速夹去眼球,将鼠倒立,用器皿接住流出的血液。采血完毕立即用纱布压榨止血。大鼠少用。 3.心脏采血小鼠采血量0.5-0.6ml,大鼠采血量1-1.5ml鼠仰卧位固定,剪去胸前区被毛,皮肤消毒后,用左手食指在左侧第3-4肋间触摸到心搏处,右手持带有4-5号针头的注射器,选择心搏zui强处穿刺,当刺中心脏时,血液会主动进入注射器。 4.断头采血小鼠采血0.8-1.2ml,大鼠采血量5-10ml左手拇指和食指从背部捉住鼠颈部皮肤,将鼠头朝下,右手用剪刀剪断鼠颈部约1/2-4/5,让血液流入试管。 5.眼眶静脉丛采血小鼠采血量为0.2-0.4ml,大鼠采血量为0.4-0.8ml取内径为1.0-1.5mm的玻璃毛细管,临用前折断成1~1.5cm长的毛细管段,浸入1%肝素溶液中,干燥后用。取血时左手捉住鼠两耳之间的颈背部皮肤以固定头部,悄悄向下压榨颈部两边,引起头部静脉血液回流困难使眼眶静脉丛充血,右手持毛细管由内眦部刺进结膜,再悄悄向眼底部方向推进,悄悄旋转毛细管以划破静脉丛,让血液顺毛细管流出,接收入事前准备的容器中。采血后纱布轻压眼部止血。小鼠、大鼠、豚鼠及家兔均可采纳此法取血。刺入深度小鼠为2-3mm,可采血0.2-0.3ml;大鼠为4-5mm,可采血0.4-0.8ml。Tips:1. 血清的保存:在-15℃以下血清的有效期为5年,4℃可保存数周,不宜室温保存,不宜反复冻融。配制成完全培养基后应在四周内用完,一瓶血清如无法一次用完应无菌分装成恰当数量并冷冻保存。2、血清中的絮状沉淀物:血清是多种蛋白质的混合物,在冻融过程中会出现絮状沉淀物,主要原因是由于血清中脂蛋白和纤维蛋白变性所造成。但并不影响血清本身的质量和使用。如需去除可先400g离心取上清液配制成完全培养基再过滤即可使用。3、血清的解冻:合理的解冻方式可以更好的保护血清质量并可以在*大程度上减少絮状沉淀物的产生。血清从低温冰箱中取出后,经4℃冰箱、室温、37℃水浴逐步规则摇晃均匀融解,直至完全融解后再使用。4、血清的热灭活:将血清严格56℃水浴均匀加温30分钟可以灭活血清中的补体系统。是不是所有用途的血清都需要热灭活呢?对大多数细胞来说是不需要的。激活的补体能参与溶解细胞,刺激光滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。因此在免疫学研究,培养ES细胞,昆虫细胞和平滑肌肉细胞时,建议使用热灭活血清,在正常情况下加热处理对血清的促细胞生长效应无明显促进作用,甚至会因为加热处理影响血清的质量。5、血清中的“小黑点”现象:血清在经过一段时间的低温冻存再融解后,在正常情况下会出现絮状蛋白沉淀。但往往有用户反应血清中有“小黑点”现象,认为是微生物污染。实验发现血清在37℃环境放置时间过长或经过加热灭活处理,血清中的沉淀物往往会呈增多趋势,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,让使用者误以为是血清遭受微生物污染并在分裂增殖。因此如无必要,完全可以不进行热灭活处理并保证血清的低温保存。实验证明使用血清时注意以下几点事项不但可以保证血清质量并能给使用者带来方便:◎血清可在-15℃以下低温保存。◎血清一瓶血清一次无法用完的应分装冻存,分次用完。◎血清按-15℃以下至4℃至室温至37℃逐步均匀解冻使用。◎若非必要,无须进行热灭活。若必须做血清热灭活的,须严格控制在56℃水浴30分钟均匀加热灭活。血清的定义血清指血浆除去纤维蛋白原后的胶状液体。每100ml人血清含有蛋白质6-8g,其中主要是白蛋白和球蛋白。血清不会凝固。有免疫,维持酸碱平衡和渗透压的作用,血清蛋白质亦可储备供给机体蛋白质不足时的应用。人和动物的血清常用以进行各种血清学试验,帮助诊断疾病。含抗体的血清可作为预防或治疗疾病之用 血清的主要成分血清是由血浆去除纤维蛋白原而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清是血浆中不含纤维蛋白原的胶状液体,具有维持血液的正常粘度、酸碱度、渗透压等作用。它主要由水和各种化学成分组成,这些化学成分包括白蛋白,α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,总胆固醇,谷丙转氨酶等。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。对血清的成分和作用的研究虽有很大进展,但仍存在一些问题。主要是:第一:血清的成份可能有几百种之多,对其准确的成份、含量及其作用机制仍不清楚,尤其是对其中一些多肽类生长因子、激素和脂类等尚未充分认识,这给研究工作带来许多困难;第二:血清都是批量生产,各批量之间差异很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保证每批血清的相似性极为困难,从而使实验的标准化和连续性受到限制;第三:不能排除血清中含有易变物质,这被认为是“瓶中恶化”的原因之一
小鼠血清(无菌过滤)200ml血清使用注意事项:防止发病免疫血清多用马、牛血液制备,马、牛血清对其它动物来说,也具有抗原性,有引起血清病的可能,因此,使用免疫血清要注意防止引起血清病,预防的主要措施是使用提纯的制品,不用不合格的产品;另外,不要有急功近利的想法,要按照要求剂量使用,一次用量不可过大。大鼠小鼠取血操作步骤:1.剪尾采血 小鼠每次采血量0.1ml,大鼠每次采血量0.3-0.5ml左手拇指和食指从背部捉住鼠颈部皮肤,将鼠头朝下,鼠保定后将其尾巴置于50℃热水中浸泡数分钟,使尾部血管充盈。擦干尾部,再用剪刀或刀片剪去尾尖1-2mm,用试管接流出的血液,同时自尾根部向尾尖按-摩。取血后用棉球压榨止血并用6%液体火棉胶涂在伤口处止血。 2.去除眼球采血小鼠采血量0.5-1ml左手捉住小鼠颈部皮肤,轻压在实验台上,取侧卧位,左手食指尽量将小鼠眼周皮肤往颈后压,使眼球杰出。用眼科弯镊迅速夹去眼球,将鼠倒立,用器皿接住流出的血液。采血完毕立即用纱布压榨止血。大鼠少用。 3.心脏采血小鼠采血量0.5-0.6ml,大鼠采血量1-1.5ml鼠仰卧位固定,剪去胸前区被毛,皮肤消毒后,用左手食指在左侧第3-4肋间触摸到心搏处,右手持带有4-5号针头的注射器,选择心搏zui强处穿刺,当刺中心脏时,血液会主动进入注射器。 4.断头采血小鼠采血0.8-1.2ml,大鼠采血量5-10ml左手拇指和食指从背部捉住鼠颈部皮肤,将鼠头朝下,右手用剪刀剪断鼠颈部约1/2-4/5,让血液流入试管。 5.眼眶静脉丛采血小鼠采血量为0.2-0.4ml,大鼠采血量为0.4-0.8ml取内径为1.0-1.5mm的玻璃毛细管,临用前折断成1~1.5cm长的毛细管段,浸入1%肝素溶液中,干燥后用。取血时左手捉住鼠两耳之间的颈背部皮肤以固定头部,悄悄向下压榨颈部两边,引起头部静脉血液回流困难使眼眶静脉丛充血,右手持毛细管由内眦部刺进结膜,再悄悄向眼底部方向推进,悄悄旋转毛细管以划破静脉丛,让血液顺毛细管流出,接收入事前准备的容器中。采血后纱布轻压眼部止血。小鼠、大鼠、豚鼠及家兔均可采纳此法取血。刺入深度小鼠为2-3mm,可采血0.2-0.3ml;大鼠为4-5mm,可采血0.4-0.8ml。Tips:1. 血清的保存:在-15℃以下血清的有效期为5年,4℃可保存数周,不宜室温保存,不宜反复冻融。配制成完全培养基后应在四周内用完,一瓶血清如无法一次用完应无菌分装成恰当数量并冷冻保存。2、血清中的絮状沉淀物:血清是多种蛋白质的混合物,在冻融过程中会出现絮状沉淀物,主要原因是由于血清中脂蛋白和纤维蛋白变性所造成。但并不影响血清本身的质量和使用。如需去除可先400g离心取上清液配制成完全培养基再过滤即可使用。3、血清的解冻:合理的解冻方式可以更好的保护血清质量并可以在*大程度上减少絮状沉淀物的产生。血清从低温冰箱中取出后,经4℃冰箱、室温、37℃水浴逐步规则摇晃均匀融解,直至完全融解后再使用。4、血清的热灭活:将血清严格56℃水浴均匀加温30分钟可以灭活血清中的补体系统。是不是所有用途的血清都需要热灭活呢?对大多数细胞来说是不需要的。激活的补体能参与溶解细胞,刺激光滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。因此在免疫学研究,培养ES细胞,昆虫细胞和平滑肌肉细胞时,建议使用热灭活血清,在正常情况下加热处理对血清的促细胞生长效应无明显促进作用,甚至会因为加热处理影响血清的质量。5、血清中的“小黑点”现象:血清在经过一段时间的低温冻存再融解后,在正常情况下会出现絮状蛋白沉淀。但往往有用户反应血清中有“小黑点”现象,认为是微生物污染。实验发现血清在37℃环境放置时间过长或经过加热灭活处理,血清中的沉淀物往往会呈增多趋势,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,让使用者误以为是血清遭受微生物污染并在分裂增殖。因此如无必要,完全可以不进行热灭活处理并保证血清的低温保存。实验证明使用血清时注意以下几点事项不但可以保证血清质量并能给使用者带来方便:◎血清可在-15℃以下低温保存。◎血清一瓶血清一次无法用完的应分装冻存,分次用完。◎血清按-15℃以下至4℃至室温至37℃逐步均匀解冻使用。◎若非必要,无须进行热灭活。若必须做血清热灭活的,须严格控制在56℃水浴30分钟均匀加热灭活。血清的定义血清指血浆除去纤维蛋白原后的胶状液体。每100ml人血清含有蛋白质6-8g,其中主要是白蛋白和球蛋白。血清不会凝固。有免疫,维持酸碱平衡和渗透压的作用,血清蛋白质亦可储备供给机体蛋白质不足时的应用。人和动物的血清常用以进行各种血清学试验,帮助诊断疾病。含抗体的血清可作为预防或治疗疾病之用 血清的主要成分血清是由血浆去除纤维蛋白原而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清是血浆中不含纤维蛋白原的胶状液体,具有维持血液的正常粘度、酸碱度、渗透压等作用。它主要由水和各种化学成分组成,这些化学成分包括白蛋白,α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,总胆固醇,谷丙转氨酶等。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。对血清的成分和作用的研究虽有很大进展,但仍存在一些问题。主要是:第一:血清的成份可能有几百种之多,对其准确的成份、含量及其作用机制仍不清楚,尤其是对其中一些多肽类生长因子、激素和脂类等尚未充分认识,这给研究工作带来许多困难;第二:血清都是批量生产,各批量之间差异很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保证每批血清的相似性极为困难,从而使实验的标准化和连续性受到限制;第三:不能排除血清中含有易变物质,这被认为是“瓶中恶化”的原因之一
小鼠血清(无菌过滤)ml血清使用注意事项:防止发病免疫血清多用马、牛血液制备,马、牛血清对其它动物来说,也具有抗原性,有引起血清病的可能,因此,使用免疫血清要注意防止引起血清病,预防的主要措施是使用提纯的制品,不用不合格的产品;另外,不要有急功近利的想法,要按照要求剂量使用,一次用量不可过大。大鼠小鼠取血操作步骤:1.剪尾采血 小鼠每次采血量0.1ml,大鼠每次采血量0.3-0.5ml左手拇指和食指从背部捉住鼠颈部皮肤,将鼠头朝下,鼠保定后将其尾巴置于50℃热水中浸泡数分钟,使尾部血管充盈。擦干尾部,再用剪刀或刀片剪去尾尖1-2mm,用试管接流出的血液,同时自尾根部向尾尖按-摩。取血后用棉球压榨止血并用6%液体火棉胶涂在伤口处止血。 2.去除眼球采血小鼠采血量0.5-1ml左手捉住小鼠颈部皮肤,轻压在实验台上,取侧卧位,左手食指尽量将小鼠眼周皮肤往颈后压,使眼球杰出。用眼科弯镊迅速夹去眼球,将鼠倒立,用器皿接住流出的血液。采血完毕立即用纱布压榨止血。大鼠少用。 3.心脏采血小鼠采血量0.5-0.6ml,大鼠采血量1-1.5ml鼠仰卧位固定,剪去胸前区被毛,皮肤消毒后,用左手食指在左侧第3-4肋间触摸到心搏处,右手持带有4-5号针头的注射器,选择心搏zui强处穿刺,当刺中心脏时,血液会主动进入注射器。 4.断头采血小鼠采血0.8-1.2ml,大鼠采血量5-10ml左手拇指和食指从背部捉住鼠颈部皮肤,将鼠头朝下,右手用剪刀剪断鼠颈部约1/2-4/5,让血液流入试管。 5.眼眶静脉丛采血小鼠采血量为0.2-0.4ml,大鼠采血量为0.4-0.8ml取内径为1.0-1.5mm的玻璃毛细管,临用前折断成1~1.5cm长的毛细管段,浸入1%肝素溶液中,干燥后用。取血时左手捉住鼠两耳之间的颈背部皮肤以固定头部,悄悄向下压榨颈部两边,引起头部静脉血液回流困难使眼眶静脉丛充血,右手持毛细管由内眦部刺进结膜,再悄悄向眼底部方向推进,悄悄旋转毛细管以划破静脉丛,让血液顺毛细管流出,接收入事前准备的容器中。采血后纱布轻压眼部止血。小鼠、大鼠、豚鼠及家兔均可采纳此法取血。刺入深度小鼠为2-3mm,可采血0.2-0.3ml;大鼠为4-5mm,可采血0.4-0.8ml。Tips:1. 血清的保存:在-15℃以下血清的有效期为5年,4℃可保存数周,不宜室温保存,不宜反复冻融。配制成完全培养基后应在四周内用完,一瓶血清如无法一次用完应无菌分装成恰当数量并冷冻保存。2、血清中的絮状沉淀物:血清是多种蛋白质的混合物,在冻融过程中会出现絮状沉淀物,主要原因是由于血清中脂蛋白和纤维蛋白变性所造成。但并不影响血清本身的质量和使用。如需去除可先400g离心取上清液配制成完全培养基再过滤即可使用。3、血清的解冻:合理的解冻方式可以更好的保护血清质量并可以在*大程度上减少絮状沉淀物的产生。血清从低温冰箱中取出后,经4℃冰箱、室温、37℃水浴逐步规则摇晃均匀融解,直至完全融解后再使用。4、血清的热灭活:将血清严格56℃水浴均匀加温30分钟可以灭活血清中的补体系统。是不是所有用途的血清都需要热灭活呢?对大多数细胞来说是不需要的。激活的补体能参与溶解细胞,刺激光滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。因此在免疫学研究,培养ES细胞,昆虫细胞和平滑肌肉细胞时,建议使用热灭活血清,在正常情况下加热处理对血清的促细胞生长效应无明显促进作用,甚至会因为加热处理影响血清的质量。5、血清中的“小黑点”现象:血清在经过一段时间的低温冻存再融解后,在正常情况下会出现絮状蛋白沉淀。但往往有用户反应血清中有“小黑点”现象,认为是微生物污染。实验发现血清在37℃环境放置时间过长或经过加热灭活处理,血清中的沉淀物往往会呈增多趋势,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,让使用者误以为是血清遭受微生物污染并在分裂增殖。因此如无必要,完全可以不进行热灭活处理并保证血清的低温保存。实验证明使用血清时注意以下几点事项不但可以保证血清质量并能给使用者带来方便:◎血清可在-15℃以下低温保存。◎血清一瓶血清一次无法用完的应分装冻存,分次用完。◎血清按-15℃以下至4℃至室温至37℃逐步均匀解冻使用。◎若非必要,无须进行热灭活。若必须做血清热灭活的,须严格控制在56℃水浴30分钟均匀加热灭活。血清的定义血清指血浆除去纤维蛋白原后的胶状液体。每100ml人血清含有蛋白质6-8g,其中主要是白蛋白和球蛋白。血清不会凝固。有免疫,维持酸碱平衡和渗透压的作用,血清蛋白质亦可储备供给机体蛋白质不足时的应用。人和动物的血清常用以进行各种血清学试验,帮助诊断疾病。含抗体的血清可作为预防或治疗疾病之用 血清的主要成分血清是由血浆去除纤维蛋白原而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清是血浆中不含纤维蛋白原的胶状液体,具有维持血液的正常粘度、酸碱度、渗透压等作用。它主要由水和各种化学成分组成,这些化学成分包括白蛋白,α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,总胆固醇,谷丙转氨酶等。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。对血清的成分和作用的研究虽有很大进展,但仍存在一些问题。主要是:第一:血清的成份可能有几百种之多,对其准确的成份、含量及其作用机制仍不清楚,尤其是对其中一些多肽类生长因子、激素和脂类等尚未充分认识,这给研究工作带来许多困难;第二:血清都是批量生产,各批量之间差异很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保证每批血清的相似性极为困难,从而使实验的标准化和连续性受到限制;第三:不能排除血清中含有易变物质,这被认为是“瓶中恶化”的原因之一
山羊(Goat)关节炎脑炎(CAE)ELISA检测试剂盒本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断检测原理·试剂盒采用双抗原一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被山羊关节炎脑炎抗体包被微孔中,依次加入标本、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中山羊关节炎脑炎(CAE)的存在与否。样品收集、处理及保存方法1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品1. 酶标仪(450nm)2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱操作注意事项1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。3. 预处理后的样本请按照操作步骤用样本稀释液适当稀释以达到试剂盒的的*佳检测效果。4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5. 所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无阴性对照0.5mL 0.5mL 无阳性对照0.5mL 0.5mL 无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释样本稀释液6mL3mL无底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无 试剂的准备 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。操作步骤1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2. 设置阴、阳性对照孔和样本孔,阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照各50μL;3. 待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;4. 随后阴、阳性对照孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断 1. 试验有效性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00; 阴性对照孔OD值平均值≤0.15。2. 临界值(Cut off)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.153. 阴性判断:样品OD值<临界值(Cut off),样品为阴性4. 阳性判断:样品OD值>临界值(Cut off),样品为阳性试剂盒性能1. 准确性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00;阴性对照孔OD值平均值≤0.15,说明试验结果有效。2. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。3. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。4. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。5. 有效期:6个月免责声明1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
绵羊(Sheep)流产衣原体(Cab)ELISA检测试剂盒本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断检测原理试剂盒采用双抗原一步夹心法免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被流产衣原体抗体的包被微孔中,依次加入标本、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中流产衣原体(Cab)的存在与否。样品收集、处理及保存方法1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品1. 酶标仪(450nm)2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱操作注意事项1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。3. 预处理后的样本无需稀释,直接取50μL加样即可。4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5. 所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无阴性对照0.5mL 0.5mL 无阳性对照0.5mL 0.5mL 无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释样本稀释液6mL3mL无底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无 试剂的准备 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。操作步骤1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2. 设置阴、阳性对照孔和样本孔,阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照各50μL;3. 待测样本孔加待测样本50μL;4. 随后阴、阳性对照孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断 1. 试验有效性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00; 阴性对照孔OD值平均值≤0.15。2. 临界值(Cut off)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.153. 阴性判断:样品OD值<临界值(Cut off),样品为阴性4. 阳性判断:样品OD值>临界值(Cut off),样品为阳性试剂盒性能1. 准确性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00;阴性对照孔OD值平均值≤0.15,说明试验结果有效。2. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。3. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。4. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。5. 有效期:6个月免责声明1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
猪(Porcine)繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ELISA检测试剂盒本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断检测原理试剂盒采用双抗原一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的包被微孔中,依次加入标本、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)病毒的存在与否。样品收集、处理及保存方法1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品1. 酶标仪(450nm)2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱操作注意事项1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。3. 预处理后的样本请按照操作步骤用样本稀释液适当稀释以达到试剂盒的的*佳检测效果。4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5. 所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无阴性对照0.5mL 0.5mL 无阳性对照0.5mL 0.5mL 无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释样本稀释液6mL3mL无底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无 试剂的准备 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。操作步骤1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2. 设置阴、阳性对照孔和样本孔,阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照各50μL;3. 待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;4. 随后阴、阳性对照孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断 1. 试验有效性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00; 阴性对照孔OD值平均值≤0.15。2. 临界值(Cut off)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.153. 阴性判断:样品OD值<临界值(Cut off),样品为阴性4. 阳性判断:样品OD值>临界值(Cut off),样品为阳性试剂盒性能1. 准确性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00;阴性对照孔OD值平均值≤0.15,说明试验结果有效。2. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。3. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。4. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。5. 有效期:6个月免责声明1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。