鹅（Goose）组织蛋白酶（CATH）ELISA检测试剂盒【产品货号】DM-QT46483【包装规格】48/96T【用途】本试剂盒用于体外定量检测[样本类型，如：人血清、血浆、组织匀浆等]中的含量。仅供科研使用，不用于临床诊断。【检测原理】试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被检测指标抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成＊终的黄色。颜色的深浅和样品中的检测指标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。1 将抗体包被在酶标板底部，加入待测抗原2 加入酶标二抗放大信号3 捕获抗体和检测抗体分别结合抗原的不同表位，形成“抗体-抗原-抗体”的三明治结构4 加入底物5 酶催化底物显色，吸光度与抗原浓度成正比，适用于大分子抗原的定量检测，如细胞因子、蛋白质等【主要组成成分】组分名称规格数量酶标板96孔（包被抗体）1块标准品[浓度，如：0 ng/mL, 2 ng/mL, 4 ng/mL, 8 ng/mL, 16 ng/mL, 32 ng/mL]6瓶酶标记抗体10mL1瓶底物溶液（TMB）10mL1瓶终止液（2M H₂SO₄）10mL1瓶浓缩洗涤液（20×）50mL1瓶样品稀释液30mL1瓶说明书-1份【储存条件及有效期】试剂盒未开封时，于2-8℃避光保存，有效期为6个月。酶标板需密封保存于2-8℃，避免受潮。【需要准备的器材和试剂】1. 酶标仪（450nm）2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱【操作步骤】1. 试剂准备浓缩洗涤液：用蒸馏水或去离子水按1:20稀释（如5mL浓缩洗涤液+95mL水），充分混匀。稀释后的洗涤液在2-8℃可保存1周。标准品：根据说明书要求，用样品稀释液将标准品进行梯度稀释（具体稀释方法见说明书附录）。酶标记抗体：使用前需室温平衡30分钟，若有沉淀，可轻轻混匀。2. 样本处理按照常规方法采集和处理[样本类型]，具体处理步骤如下：血清：全血样本室温静置30分钟，3000rpm离心10分钟，取上清液。血浆：使用抗凝管采集血液，3000rpm离心10分钟，取上清液。组织匀浆：取适量组织，按1:9比例加入PBS（pH7.4），冰浴匀浆，3000rpm离心10分钟，取上清液。样本需在-20℃保存，避免反复冻融，检测前需室温解冻并充分混匀，如有沉淀需再次离心。3.加样将酶标板从铝箔袋中取出，平衡至室温。设标准品孔、样本孔和空白孔。空白孔加50μL样品稀释液，标准品孔分别加50μL不同浓度的标准品，样本孔加50μL待测样本。轻轻震荡混匀，37℃孵育30分钟。4. 洗涤弃去孔内液体，拍干。每孔加入200μL稀释后的洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。5. 加酶标记抗体除空白孔外，每孔加入50μL酶标记抗体。轻轻震荡混匀，37℃孵育30分钟。6. 洗涤同步骤4，洗涤5次。7. 显色每孔加入50μL底物溶液（TMB），轻轻震荡混匀，37℃避光孵育15分钟。8. 终止每孔加入50μL终止液，轻轻震荡混匀，此时蓝色立即变为黄色。9. 测定在终止反应后10分钟内，用酶标仪在450nm波长处测定各孔的吸光度（OD值）。【结果计算】以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘制标准曲线，或使用酶标仪自带软件进行曲线拟合。根据样品的OD值，从标准曲线上查出相应的[检测项目名称]浓度。标准曲线绘制示例：标准品浓度（ng/mL）：0, 2, 4, 8, 16, 32对应的OD值：[示例值，如：0.100, 0.250, 0.480, 0.850, 1.400, 2.100]建议采用四参数 logistic 曲线（4-PL）拟合，相关系数R²应≥0.99。【检测方法的局限性】本试剂盒仅供科研使用，结果不能作为临床诊断的唯一依据。样本处理不当可能导致结果偏差，应严格按照说明书操作。高浓度样本可能存在hook效应，建议对OD值异常高的样本进行适当稀释后重新检测。【注意事项】实验前请仔细阅读说明书，严格按照操作步骤进行。所有试剂需在有效期内使用，不同批次的试剂不得混用。操作时需戴手套、口罩，避免试剂接触皮肤和黏膜。TMB底物溶液有潜在致癌性，终止液为强酸，操作时需小心，若不慎接触，立即用大量清水冲洗。实验结束后，废弃物应按照生物安全规定处理。【标准品稀释方法】1. 高浓度标准品（如32 ng/mL）为母液，无需稀释。2. 取50μL 32 ng/mL标准品加入50μL样品稀释液中，混匀，得到16 ng/mL标准品。3. 取50μL 16 ng/mL标准品加入50μL样品稀释液中，混匀，得到8 ng/mL标准品。4. 依次类推，稀释得到4 ng/mL、2 ng/mL标准品。5. 0 ng/mL标准品即为样品稀释液。【东升国际实验服务代测】ELISA实验代测ELISA（酶联免疫吸附实验）代测是科研和临床检测中＊常用的外包服务之一，基于抗原抗体特异性结合原理，可对生物样本中的微量物质进行定量或定性检测。一、按检测靶标类型分类1. 细胞因子与趋化因子类这是科研中需求量＊大的代测类别，主要用于免疫、炎症、肿瘤、心血管等研究白细胞介素家族：IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12、IL-17、IL-23 等干扰素家族：IFN-α、IFN-β、IFN-γ肿瘤坏死因子家族：TNF-α、TNF-β、LTA趋化因子家族：CCL2 (MCP-1)、CCL5 (RANTES)、CXCL8 (IL-8)、CXCL10 (IP-10)生长因子家族：EGF、VEGF、FGF、PDGF、TGF-β、NGF、IGF-12. 炎症与免疫相关标志物急性期反应蛋白：CRP、SAA、PCT、纤维蛋白原补体系统：C3、C4、C5a、C1q免疫球蛋白：IgG、IgA、IgM、IgE、IgD 及各亚型免疫细胞表面标志物：sCD4、sCD8、sCD14、sCD1633. 激素与内分泌相关垂体激素：FSH、LH、TSH、GH、PRL、ACTH甲状腺激素：T3、T4、FT3、FT4、TSH性激素：雌二醇 (E2)、孕酮 (P)、睾酮 (T)、雌酮、脱氢表雄酮代谢激素：胰岛素、胰高血糖素、瘦素 (Leptin)、脂联素 (Adiponectin)、抵抗素应激激素：皮质醇、肾上腺素、去甲肾上腺素4. 肿瘤标志物广谱肿瘤标志物：CEA、AFP、CA125、CA19-9、CA15-3、CA72-4器官特异性标志物：PSA (前列腺)、NSE (神经内分泌)、CYFRA21-1 (肺癌)、SCC (鳞状细胞癌)肿瘤相关蛋白：MMP-2、MMP-9、TIMP-1、VEGF、EGFR5. 自身抗体类抗核抗体谱：ANA、抗 ds-DNA、抗 Sm、抗 SSA、抗 SSB类风湿相关：RF、抗 CCP、抗角蛋白抗体血管炎相关：ANCA (c-ANCA、p-ANCA)、抗内皮细胞抗体其他自身抗体：抗甲状腺抗体 (TPOAb、TgAb)、抗胰岛素抗体、抗磷脂抗体6. 心血管疾病相关标志物心肌损伤标志物：cTnI、cTnT、CK-MB、Myoglobin心功能标志物：BNP、NT-proBNP动脉粥样硬化标志物：ox-LDL、Lp-PLA2、hs-CRP、同型半胱氨酸凝血与纤溶：D - 二聚体、FDP、PAI-1、t-PA7. 神经科学相关神经递质：5 - 羟色胺、多巴胺、去甲肾上腺素、乙酰胆碱、γ- 氨基丁酸神经退行性标志物：Aβ1-40、Aβ1-42、Tau 蛋白、磷酸化 Tau 蛋白神经炎症标志物：GFAP、S100B、NSE、MBP8. 其他常见靶标代谢物：葡萄糖、胆固醇、甘油三酯、尿酸、肌酐病原体抗原 / 抗体：乙肝五项、丙肝抗体、梅毒抗体、HIV 抗体、新冠病毒抗原 / 抗体药物浓度：抗生素、化疗药物、免疫抑制剂血药浓度qPCR实验代测实验四步走：1. 提取RNA → 记得防RNase污染！用Trizol＊稳2.逆转录 → 把RNA变成cDNA，这是关键一步3.上机运行 → 探针法更特异，染料法更便宜4.数据分析 → 用 2^(-ΔΔCt) 公式算相对表达量！ 血泪注意事项：引物Tm值＊好在60-64℃哦！染料法(如SYBR Green)一定要看熔解曲线，排除非特异性扩增！基线和阈值设置别乱调～所有操作都要防核酸酶污染！
鹅（Goose）免疫球蛋白M（IgM）ELISA检测试剂盒【产品货号】DM-QT46481【包装规格】48/96T【用途】本试剂盒用于体外定量检测[样本类型，如：人血清、血浆、组织匀浆等]中的含量。仅供科研使用，不用于临床诊断。【检测原理】试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被检测指标抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成＊终的黄色。颜色的深浅和样品中的检测指标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。1 将抗体包被在酶标板底部，加入待测抗原2 加入酶标二抗放大信号3 捕获抗体和检测抗体分别结合抗原的不同表位，形成“抗体-抗原-抗体”的三明治结构4 加入底物5 酶催化底物显色，吸光度与抗原浓度成正比，适用于大分子抗原的定量检测，如细胞因子、蛋白质等【主要组成成分】组分名称规格数量酶标板96孔（包被抗体）1块标准品[浓度，如：0 ng/mL, 2 ng/mL, 4 ng/mL, 8 ng/mL, 16 ng/mL, 32 ng/mL]6瓶酶标记抗体10mL1瓶底物溶液（TMB）10mL1瓶终止液（2M H₂SO₄）10mL1瓶浓缩洗涤液（20×）50mL1瓶样品稀释液30mL1瓶说明书-1份【储存条件及有效期】试剂盒未开封时，于2-8℃避光保存，有效期为6个月。酶标板需密封保存于2-8℃，避免受潮。【需要准备的器材和试剂】1. 酶标仪（450nm）2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱【操作步骤】1. 试剂准备浓缩洗涤液：用蒸馏水或去离子水按1:20稀释（如5mL浓缩洗涤液+95mL水），充分混匀。稀释后的洗涤液在2-8℃可保存1周。标准品：根据说明书要求，用样品稀释液将标准品进行梯度稀释（具体稀释方法见说明书附录）。酶标记抗体：使用前需室温平衡30分钟，若有沉淀，可轻轻混匀。2. 样本处理按照常规方法采集和处理[样本类型]，具体处理步骤如下：血清：全血样本室温静置30分钟，3000rpm离心10分钟，取上清液。血浆：使用抗凝管采集血液，3000rpm离心10分钟，取上清液。组织匀浆：取适量组织，按1:9比例加入PBS（pH7.4），冰浴匀浆，3000rpm离心10分钟，取上清液。样本需在-20℃保存，避免反复冻融，检测前需室温解冻并充分混匀，如有沉淀需再次离心。3.加样将酶标板从铝箔袋中取出，平衡至室温。设标准品孔、样本孔和空白孔。空白孔加50μL样品稀释液，标准品孔分别加50μL不同浓度的标准品，样本孔加50μL待测样本。轻轻震荡混匀，37℃孵育30分钟。4. 洗涤弃去孔内液体，拍干。每孔加入200μL稀释后的洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。5. 加酶标记抗体除空白孔外，每孔加入50μL酶标记抗体。轻轻震荡混匀，37℃孵育30分钟。6. 洗涤同步骤4，洗涤5次。7. 显色每孔加入50μL底物溶液（TMB），轻轻震荡混匀，37℃避光孵育15分钟。8. 终止每孔加入50μL终止液，轻轻震荡混匀，此时蓝色立即变为黄色。9. 测定在终止反应后10分钟内，用酶标仪在450nm波长处测定各孔的吸光度（OD值）。【结果计算】以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘制标准曲线，或使用酶标仪自带软件进行曲线拟合。根据样品的OD值，从标准曲线上查出相应的[检测项目名称]浓度。标准曲线绘制示例：标准品浓度（ng/mL）：0, 2, 4, 8, 16, 32对应的OD值：[示例值，如：0.100, 0.250, 0.480, 0.850, 1.400, 2.100]建议采用四参数 logistic 曲线（4-PL）拟合，相关系数R²应≥0.99。【检测方法的局限性】本试剂盒仅供科研使用，结果不能作为临床诊断的唯一依据。样本处理不当可能导致结果偏差，应严格按照说明书操作。高浓度样本可能存在hook效应，建议对OD值异常高的样本进行适当稀释后重新检测。【注意事项】实验前请仔细阅读说明书，严格按照操作步骤进行。所有试剂需在有效期内使用，不同批次的试剂不得混用。操作时需戴手套、口罩，避免试剂接触皮肤和黏膜。TMB底物溶液有潜在致癌性，终止液为强酸，操作时需小心，若不慎接触，立即用大量清水冲洗。实验结束后，废弃物应按照生物安全规定处理。【标准品稀释方法】1. 高浓度标准品（如32 ng/mL）为母液，无需稀释。2. 取50μL 32 ng/mL标准品加入50μL样品稀释液中，混匀，得到16 ng/mL标准品。3. 取50μL 16 ng/mL标准品加入50μL样品稀释液中，混匀，得到8 ng/mL标准品。4. 依次类推，稀释得到4 ng/mL、2 ng/mL标准品。5. 0 ng/mL标准品即为样品稀释液。【东升国际实验服务代测】ELISA实验代测ELISA（酶联免疫吸附实验）代测是科研和临床检测中＊常用的外包服务之一，基于抗原抗体特异性结合原理，可对生物样本中的微量物质进行定量或定性检测。一、按检测靶标类型分类1. 细胞因子与趋化因子类这是科研中需求量＊大的代测类别，主要用于免疫、炎症、肿瘤、心血管等研究白细胞介素家族：IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12、IL-17、IL-23 等干扰素家族：IFN-α、IFN-β、IFN-γ肿瘤坏死因子家族：TNF-α、TNF-β、LTA趋化因子家族：CCL2 (MCP-1)、CCL5 (RANTES)、CXCL8 (IL-8)、CXCL10 (IP-10)生长因子家族：EGF、VEGF、FGF、PDGF、TGF-β、NGF、IGF-12. 炎症与免疫相关标志物急性期反应蛋白：CRP、SAA、PCT、纤维蛋白原补体系统：C3、C4、C5a、C1q免疫球蛋白：IgG、IgA、IgM、IgE、IgD 及各亚型免疫细胞表面标志物：sCD4、sCD8、sCD14、sCD1633. 激素与内分泌相关垂体激素：FSH、LH、TSH、GH、PRL、ACTH甲状腺激素：T3、T4、FT3、FT4、TSH性激素：雌二醇 (E2)、孕酮 (P)、睾酮 (T)、雌酮、脱氢表雄酮代谢激素：胰岛素、胰高血糖素、瘦素 (Leptin)、脂联素 (Adiponectin)、抵抗素应激激素：皮质醇、肾上腺素、去甲肾上腺素4. 肿瘤标志物广谱肿瘤标志物：CEA、AFP、CA125、CA19-9、CA15-3、CA72-4器官特异性标志物：PSA (前列腺)、NSE (神经内分泌)、CYFRA21-1 (肺癌)、SCC (鳞状细胞癌)肿瘤相关蛋白：MMP-2、MMP-9、TIMP-1、VEGF、EGFR5. 自身抗体类抗核抗体谱：ANA、抗 ds-DNA、抗 Sm、抗 SSA、抗 SSB类风湿相关：RF、抗 CCP、抗角蛋白抗体血管炎相关：ANCA (c-ANCA、p-ANCA)、抗内皮细胞抗体其他自身抗体：抗甲状腺抗体 (TPOAb、TgAb)、抗胰岛素抗体、抗磷脂抗体6. 心血管疾病相关标志物心肌损伤标志物：cTnI、cTnT、CK-MB、Myoglobin心功能标志物：BNP、NT-proBNP动脉粥样硬化标志物：ox-LDL、Lp-PLA2、hs-CRP、同型半胱氨酸凝血与纤溶：D - 二聚体、FDP、PAI-1、t-PA7. 神经科学相关神经递质：5 - 羟色胺、多巴胺、去甲肾上腺素、乙酰胆碱、γ- 氨基丁酸神经退行性标志物：Aβ1-40、Aβ1-42、Tau 蛋白、磷酸化 Tau 蛋白神经炎症标志物：GFAP、S100B、NSE、MBP8. 其他常见靶标代谢物：葡萄糖、胆固醇、甘油三酯、尿酸、肌酐病原体抗原 / 抗体：乙肝五项、丙肝抗体、梅毒抗体、HIV 抗体、新冠病毒抗原 / 抗体药物浓度：抗生素、化疗药物、免疫抑制剂血药浓度qPCR实验代测实验四步走：1. 提取RNA → 记得防RNase污染！用Trizol＊稳2.逆转录 → 把RNA变成cDNA，这是关键一步3.上机运行 → 探针法更特异，染料法更便宜4.数据分析 → 用 2^(-ΔΔCt) 公式算相对表达量！ 血泪注意事项：引物Tm值＊好在60-64℃哦！染料法(如SYBR Green)一定要看熔解曲线，排除非特异性扩增！基线和阈值设置别乱调～所有操作都要防核酸酶污染！
鹅（Goose）免疫球蛋白A（IgA）ELISA检测试剂盒【产品货号】DM-QT46480【包装规格】48/96T【用途】本试剂盒用于体外定量检测[样本类型，如：人血清、血浆、组织匀浆等]中的含量。仅供科研使用，不用于临床诊断。【检测原理】试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被检测指标抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成＊终的黄色。颜色的深浅和样品中的检测指标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。1 将抗体包被在酶标板底部，加入待测抗原2 加入酶标二抗放大信号3 捕获抗体和检测抗体分别结合抗原的不同表位，形成“抗体-抗原-抗体”的三明治结构4 加入底物5 酶催化底物显色，吸光度与抗原浓度成正比，适用于大分子抗原的定量检测，如细胞因子、蛋白质等【主要组成成分】组分名称规格数量酶标板96孔（包被抗体）1块标准品[浓度，如：0 ng/mL, 2 ng/mL, 4 ng/mL, 8 ng/mL, 16 ng/mL, 32 ng/mL]6瓶酶标记抗体10mL1瓶底物溶液（TMB）10mL1瓶终止液（2M H₂SO₄）10mL1瓶浓缩洗涤液（20×）50mL1瓶样品稀释液30mL1瓶说明书-1份【储存条件及有效期】试剂盒未开封时，于2-8℃避光保存，有效期为6个月。酶标板需密封保存于2-8℃，避免受潮。【需要准备的器材和试剂】1. 酶标仪（450nm）2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱【操作步骤】1. 试剂准备浓缩洗涤液：用蒸馏水或去离子水按1:20稀释（如5mL浓缩洗涤液+95mL水），充分混匀。稀释后的洗涤液在2-8℃可保存1周。标准品：根据说明书要求，用样品稀释液将标准品进行梯度稀释（具体稀释方法见说明书附录）。酶标记抗体：使用前需室温平衡30分钟，若有沉淀，可轻轻混匀。2. 样本处理按照常规方法采集和处理[样本类型]，具体处理步骤如下：血清：全血样本室温静置30分钟，3000rpm离心10分钟，取上清液。血浆：使用抗凝管采集血液，3000rpm离心10分钟，取上清液。组织匀浆：取适量组织，按1:9比例加入PBS（pH7.4），冰浴匀浆，3000rpm离心10分钟，取上清液。样本需在-20℃保存，避免反复冻融，检测前需室温解冻并充分混匀，如有沉淀需再次离心。3.加样将酶标板从铝箔袋中取出，平衡至室温。设标准品孔、样本孔和空白孔。空白孔加50μL样品稀释液，标准品孔分别加50μL不同浓度的标准品，样本孔加50μL待测样本。轻轻震荡混匀，37℃孵育30分钟。4. 洗涤弃去孔内液体，拍干。每孔加入200μL稀释后的洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。5. 加酶标记抗体除空白孔外，每孔加入50μL酶标记抗体。轻轻震荡混匀，37℃孵育30分钟。6. 洗涤同步骤4，洗涤5次。7. 显色每孔加入50μL底物溶液（TMB），轻轻震荡混匀，37℃避光孵育15分钟。8. 终止每孔加入50μL终止液，轻轻震荡混匀，此时蓝色立即变为黄色。9. 测定在终止反应后10分钟内，用酶标仪在450nm波长处测定各孔的吸光度（OD值）。【结果计算】以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘制标准曲线，或使用酶标仪自带软件进行曲线拟合。根据样品的OD值，从标准曲线上查出相应的[检测项目名称]浓度。标准曲线绘制示例：标准品浓度（ng/mL）：0, 2, 4, 8, 16, 32对应的OD值：[示例值，如：0.100, 0.250, 0.480, 0.850, 1.400, 2.100]建议采用四参数 logistic 曲线（4-PL）拟合，相关系数R²应≥0.99。【检测方法的局限性】本试剂盒仅供科研使用，结果不能作为临床诊断的唯一依据。样本处理不当可能导致结果偏差，应严格按照说明书操作。高浓度样本可能存在hook效应，建议对OD值异常高的样本进行适当稀释后重新检测。【注意事项】实验前请仔细阅读说明书，严格按照操作步骤进行。所有试剂需在有效期内使用，不同批次的试剂不得混用。操作时需戴手套、口罩，避免试剂接触皮肤和黏膜。TMB底物溶液有潜在致癌性，终止液为强酸，操作时需小心，若不慎接触，立即用大量清水冲洗。实验结束后，废弃物应按照生物安全规定处理。【标准品稀释方法】1. 高浓度标准品（如32 ng/mL）为母液，无需稀释。2. 取50μL 32 ng/mL标准品加入50μL样品稀释液中，混匀，得到16 ng/mL标准品。3. 取50μL 16 ng/mL标准品加入50μL样品稀释液中，混匀，得到8 ng/mL标准品。4. 依次类推，稀释得到4 ng/mL、2 ng/mL标准品。5. 0 ng/mL标准品即为样品稀释液。【东升国际实验服务代测】ELISA实验代测ELISA（酶联免疫吸附实验）代测是科研和临床检测中＊常用的外包服务之一，基于抗原抗体特异性结合原理，可对生物样本中的微量物质进行定量或定性检测。一、按检测靶标类型分类1. 细胞因子与趋化因子类这是科研中需求量＊大的代测类别，主要用于免疫、炎症、肿瘤、心血管等研究白细胞介素家族：IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12、IL-17、IL-23 等干扰素家族：IFN-α、IFN-β、IFN-γ肿瘤坏死因子家族：TNF-α、TNF-β、LTA趋化因子家族：CCL2 (MCP-1)、CCL5 (RANTES)、CXCL8 (IL-8)、CXCL10 (IP-10)生长因子家族：EGF、VEGF、FGF、PDGF、TGF-β、NGF、IGF-12. 炎症与免疫相关标志物急性期反应蛋白：CRP、SAA、PCT、纤维蛋白原补体系统：C3、C4、C5a、C1q免疫球蛋白：IgG、IgA、IgM、IgE、IgD 及各亚型免疫细胞表面标志物：sCD4、sCD8、sCD14、sCD1633. 激素与内分泌相关垂体激素：FSH、LH、TSH、GH、PRL、ACTH甲状腺激素：T3、T4、FT3、FT4、TSH性激素：雌二醇 (E2)、孕酮 (P)、睾酮 (T)、雌酮、脱氢表雄酮代谢激素：胰岛素、胰高血糖素、瘦素 (Leptin)、脂联素 (Adiponectin)、抵抗素应激激素：皮质醇、肾上腺素、去甲肾上腺素4. 肿瘤标志物广谱肿瘤标志物：CEA、AFP、CA125、CA19-9、CA15-3、CA72-4器官特异性标志物：PSA (前列腺)、NSE (神经内分泌)、CYFRA21-1 (肺癌)、SCC (鳞状细胞癌)肿瘤相关蛋白：MMP-2、MMP-9、TIMP-1、VEGF、EGFR5. 自身抗体类抗核抗体谱：ANA、抗 ds-DNA、抗 Sm、抗 SSA、抗 SSB类风湿相关：RF、抗 CCP、抗角蛋白抗体血管炎相关：ANCA (c-ANCA、p-ANCA)、抗内皮细胞抗体其他自身抗体：抗甲状腺抗体 (TPOAb、TgAb)、抗胰岛素抗体、抗磷脂抗体6. 心血管疾病相关标志物心肌损伤标志物：cTnI、cTnT、CK-MB、Myoglobin心功能标志物：BNP、NT-proBNP动脉粥样硬化标志物：ox-LDL、Lp-PLA2、hs-CRP、同型半胱氨酸凝血与纤溶：D - 二聚体、FDP、PAI-1、t-PA7. 神经科学相关神经递质：5 - 羟色胺、多巴胺、去甲肾上腺素、乙酰胆碱、γ- 氨基丁酸神经退行性标志物：Aβ1-40、Aβ1-42、Tau 蛋白、磷酸化 Tau 蛋白神经炎症标志物：GFAP、S100B、NSE、MBP8. 其他常见靶标代谢物：葡萄糖、胆固醇、甘油三酯、尿酸、肌酐病原体抗原 / 抗体：乙肝五项、丙肝抗体、梅毒抗体、HIV 抗体、新冠病毒抗原 / 抗体药物浓度：抗生素、化疗药物、免疫抑制剂血药浓度qPCR实验代测实验四步走：1. 提取RNA → 记得防RNase污染！用Trizol＊稳2.逆转录 → 把RNA变成cDNA，这是关键一步3.上机运行 → 探针法更特异，染料法更便宜4.数据分析 → 用 2^(-ΔΔCt) 公式算相对表达量！ 血泪注意事项：引物Tm值＊好在60-64℃哦！染料法(如SYBR Green)一定要看熔解曲线，排除非特异性扩增！基线和阈值设置别乱调～所有操作都要防核酸酶污染！
微生物（Microorganism）尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶（UGP） ELISA检测试剂盒【产品货号】DM-QT46479【包装规格】48/96T【用途】本试剂盒用于体外定量检测[样本类型，如：人血清、血浆、组织匀浆等]中的含量。仅供科研使用，不用于临床诊断。【检测原理】试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被检测指标抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成＊终的黄色。颜色的深浅和样品中的检测指标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。1 将抗体包被在酶标板底部，加入待测抗原2 加入酶标二抗放大信号3 捕获抗体和检测抗体分别结合抗原的不同表位，形成“抗体-抗原-抗体”的三明治结构4 加入底物5 酶催化底物显色，吸光度与抗原浓度成正比，适用于大分子抗原的定量检测，如细胞因子、蛋白质等【主要组成成分】组分名称规格数量酶标板96孔（包被抗体）1块标准品[浓度，如：0 ng/mL, 2 ng/mL, 4 ng/mL, 8 ng/mL, 16 ng/mL, 32 ng/mL]6瓶酶标记抗体10mL1瓶底物溶液（TMB）10mL1瓶终止液（2M H₂SO₄）10mL1瓶浓缩洗涤液（20×）50mL1瓶样品稀释液30mL1瓶说明书-1份【储存条件及有效期】试剂盒未开封时，于2-8℃避光保存，有效期为6个月。酶标板需密封保存于2-8℃，避免受潮。【需要准备的器材和试剂】1. 酶标仪（450nm）2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱【操作步骤】1. 试剂准备浓缩洗涤液：用蒸馏水或去离子水按1:20稀释（如5mL浓缩洗涤液+95mL水），充分混匀。稀释后的洗涤液在2-8℃可保存1周。标准品：根据说明书要求，用样品稀释液将标准品进行梯度稀释（具体稀释方法见说明书附录）。酶标记抗体：使用前需室温平衡30分钟，若有沉淀，可轻轻混匀。2. 样本处理按照常规方法采集和处理[样本类型]，具体处理步骤如下：血清：全血样本室温静置30分钟，3000rpm离心10分钟，取上清液。血浆：使用抗凝管采集血液，3000rpm离心10分钟，取上清液。组织匀浆：取适量组织，按1:9比例加入PBS（pH7.4），冰浴匀浆，3000rpm离心10分钟，取上清液。样本需在-20℃保存，避免反复冻融，检测前需室温解冻并充分混匀，如有沉淀需再次离心。3.加样将酶标板从铝箔袋中取出，平衡至室温。设标准品孔、样本孔和空白孔。空白孔加50μL样品稀释液，标准品孔分别加50μL不同浓度的标准品，样本孔加50μL待测样本。轻轻震荡混匀，37℃孵育30分钟。4. 洗涤弃去孔内液体，拍干。每孔加入200μL稀释后的洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。5. 加酶标记抗体除空白孔外，每孔加入50μL酶标记抗体。轻轻震荡混匀，37℃孵育30分钟。6. 洗涤同步骤4，洗涤5次。7. 显色每孔加入50μL底物溶液（TMB），轻轻震荡混匀，37℃避光孵育15分钟。8. 终止每孔加入50μL终止液，轻轻震荡混匀，此时蓝色立即变为黄色。9. 测定在终止反应后10分钟内，用酶标仪在450nm波长处测定各孔的吸光度（OD值）。【结果计算】以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘制标准曲线，或使用酶标仪自带软件进行曲线拟合。根据样品的OD值，从标准曲线上查出相应的[检测项目名称]浓度。标准曲线绘制示例：标准品浓度（ng/mL）：0, 2, 4, 8, 16, 32对应的OD值：[示例值，如：0.100, 0.250, 0.480, 0.850, 1.400, 2.100]建议采用四参数 logistic 曲线（4-PL）拟合，相关系数R²应≥0.99。【检测方法的局限性】本试剂盒仅供科研使用，结果不能作为临床诊断的唯一依据。样本处理不当可能导致结果偏差，应严格按照说明书操作。高浓度样本可能存在hook效应，建议对OD值异常高的样本进行适当稀释后重新检测。【注意事项】实验前请仔细阅读说明书，严格按照操作步骤进行。所有试剂需在有效期内使用，不同批次的试剂不得混用。操作时需戴手套、口罩，避免试剂接触皮肤和黏膜。TMB底物溶液有潜在致癌性，终止液为强酸，操作时需小心，若不慎接触，立即用大量清水冲洗。实验结束后，废弃物应按照生物安全规定处理。【标准品稀释方法】1. 高浓度标准品（如32 ng/mL）为母液，无需稀释。2. 取50μL 32 ng/mL标准品加入50μL样品稀释液中，混匀，得到16 ng/mL标准品。3. 取50μL 16 ng/mL标准品加入50μL样品稀释液中，混匀，得到8 ng/mL标准品。4. 依次类推，稀释得到4 ng/mL、2 ng/mL标准品。5. 0 ng/mL标准品即为样品稀释液。【东升国际实验服务代测】ELISA实验代测ELISA（酶联免疫吸附实验）代测是科研和临床检测中＊常用的外包服务之一，基于抗原抗体特异性结合原理，可对生物样本中的微量物质进行定量或定性检测。一、按检测靶标类型分类1. 细胞因子与趋化因子类这是科研中需求量＊大的代测类别，主要用于免疫、炎症、肿瘤、心血管等研究白细胞介素家族：IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12、IL-17、IL-23 等干扰素家族：IFN-α、IFN-β、IFN-γ肿瘤坏死因子家族：TNF-α、TNF-β、LTA趋化因子家族：CCL2 (MCP-1)、CCL5 (RANTES)、CXCL8 (IL-8)、CXCL10 (IP-10)生长因子家族：EGF、VEGF、FGF、PDGF、TGF-β、NGF、IGF-12. 炎症与免疫相关标志物急性期反应蛋白：CRP、SAA、PCT、纤维蛋白原补体系统：C3、C4、C5a、C1q免疫球蛋白：IgG、IgA、IgM、IgE、IgD 及各亚型免疫细胞表面标志物：sCD4、sCD8、sCD14、sCD1633. 激素与内分泌相关垂体激素：FSH、LH、TSH、GH、PRL、ACTH甲状腺激素：T3、T4、FT3、FT4、TSH性激素：雌二醇 (E2)、孕酮 (P)、睾酮 (T)、雌酮、脱氢表雄酮代谢激素：胰岛素、胰高血糖素、瘦素 (Leptin)、脂联素 (Adiponectin)、抵抗素应激激素：皮质醇、肾上腺素、去甲肾上腺素4. 肿瘤标志物广谱肿瘤标志物：CEA、AFP、CA125、CA19-9、CA15-3、CA72-4器官特异性标志物：PSA (前列腺)、NSE (神经内分泌)、CYFRA21-1 (肺癌)、SCC (鳞状细胞癌)肿瘤相关蛋白：MMP-2、MMP-9、TIMP-1、VEGF、EGFR5. 自身抗体类抗核抗体谱：ANA、抗 ds-DNA、抗 Sm、抗 SSA、抗 SSB类风湿相关：RF、抗 CCP、抗角蛋白抗体血管炎相关：ANCA (c-ANCA、p-ANCA)、抗内皮细胞抗体其他自身抗体：抗甲状腺抗体 (TPOAb、TgAb)、抗胰岛素抗体、抗磷脂抗体6. 心血管疾病相关标志物心肌损伤标志物：cTnI、cTnT、CK-MB、Myoglobin心功能标志物：BNP、NT-proBNP动脉粥样硬化标志物：ox-LDL、Lp-PLA2、hs-CRP、同型半胱氨酸凝血与纤溶：D - 二聚体、FDP、PAI-1、t-PA7. 神经科学相关神经递质：5 - 羟色胺、多巴胺、去甲肾上腺素、乙酰胆碱、γ- 氨基丁酸神经退行性标志物：Aβ1-40、Aβ1-42、Tau 蛋白、磷酸化 Tau 蛋白神经炎症标志物：GFAP、S100B、NSE、MBP8. 其他常见靶标代谢物：葡萄糖、胆固醇、甘油三酯、尿酸、肌酐病原体抗原 / 抗体：乙肝五项、丙肝抗体、梅毒抗体、HIV 抗体、新冠病毒抗原 / 抗体药物浓度：抗生素、化疗药物、免疫抑制剂血药浓度qPCR实验代测实验四步走：1. 提取RNA → 记得防RNase污染！用Trizol＊稳2.逆转录 → 把RNA变成cDNA，这是关键一步3.上机运行 → 探针法更特异，染料法更便宜4.数据分析 → 用 2^(-ΔΔCt) 公式算相对表达量！ 血泪注意事项：引物Tm值＊好在60-64℃哦！染料法(如SYBR Green)一定要看熔解曲线，排除非特异性扩增！基线和阈值设置别乱调～所有操作都要防核酸酶污染！
微生物（Microorganism）磷酸葡萄糖异构酶（PGI）ELISA检测试剂盒【产品货号】DM-QT46478【包装规格】48/96T【用途】本试剂盒用于体外定量检测[样本类型，如：人血清、血浆、组织匀浆等]中的含量。仅供科研使用，不用于临床诊断。【检测原理】试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被检测指标抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成＊终的黄色。颜色的深浅和样品中的检测指标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。1 将抗体包被在酶标板底部，加入待测抗原2 加入酶标二抗放大信号3 捕获抗体和检测抗体分别结合抗原的不同表位，形成“抗体-抗原-抗体”的三明治结构4 加入底物5 酶催化底物显色，吸光度与抗原浓度成正比，适用于大分子抗原的定量检测，如细胞因子、蛋白质等【主要组成成分】组分名称规格数量酶标板96孔（包被抗体）1块标准品[浓度，如：0 ng/mL, 2 ng/mL, 4 ng/mL, 8 ng/mL, 16 ng/mL, 32 ng/mL]6瓶酶标记抗体10mL1瓶底物溶液（TMB）10mL1瓶终止液（2M H₂SO₄）10mL1瓶浓缩洗涤液（20×）50mL1瓶样品稀释液30mL1瓶说明书-1份【储存条件及有效期】试剂盒未开封时，于2-8℃避光保存，有效期为6个月。酶标板需密封保存于2-8℃，避免受潮。【需要准备的器材和试剂】1. 酶标仪（450nm）2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱【操作步骤】1. 试剂准备浓缩洗涤液：用蒸馏水或去离子水按1:20稀释（如5mL浓缩洗涤液+95mL水），充分混匀。稀释后的洗涤液在2-8℃可保存1周。标准品：根据说明书要求，用样品稀释液将标准品进行梯度稀释（具体稀释方法见说明书附录）。酶标记抗体：使用前需室温平衡30分钟，若有沉淀，可轻轻混匀。2. 样本处理按照常规方法采集和处理[样本类型]，具体处理步骤如下：血清：全血样本室温静置30分钟，3000rpm离心10分钟，取上清液。血浆：使用抗凝管采集血液，3000rpm离心10分钟，取上清液。组织匀浆：取适量组织，按1:9比例加入PBS（pH7.4），冰浴匀浆，3000rpm离心10分钟，取上清液。样本需在-20℃保存，避免反复冻融，检测前需室温解冻并充分混匀，如有沉淀需再次离心。3.加样将酶标板从铝箔袋中取出，平衡至室温。设标准品孔、样本孔和空白孔。空白孔加50μL样品稀释液，标准品孔分别加50μL不同浓度的标准品，样本孔加50μL待测样本。轻轻震荡混匀，37℃孵育30分钟。4. 洗涤弃去孔内液体，拍干。每孔加入200μL稀释后的洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。5. 加酶标记抗体除空白孔外，每孔加入50μL酶标记抗体。轻轻震荡混匀，37℃孵育30分钟。6. 洗涤同步骤4，洗涤5次。7. 显色每孔加入50μL底物溶液（TMB），轻轻震荡混匀，37℃避光孵育15分钟。8. 终止每孔加入50μL终止液，轻轻震荡混匀，此时蓝色立即变为黄色。9. 测定在终止反应后10分钟内，用酶标仪在450nm波长处测定各孔的吸光度（OD值）。【结果计算】以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘制标准曲线，或使用酶标仪自带软件进行曲线拟合。根据样品的OD值，从标准曲线上查出相应的[检测项目名称]浓度。标准曲线绘制示例：标准品浓度（ng/mL）：0, 2, 4, 8, 16, 32对应的OD值：[示例值，如：0.100, 0.250, 0.480, 0.850, 1.400, 2.100]建议采用四参数 logistic 曲线（4-PL）拟合，相关系数R²应≥0.99。【检测方法的局限性】本试剂盒仅供科研使用，结果不能作为临床诊断的唯一依据。样本处理不当可能导致结果偏差，应严格按照说明书操作。高浓度样本可能存在hook效应，建议对OD值异常高的样本进行适当稀释后重新检测。【注意事项】实验前请仔细阅读说明书，严格按照操作步骤进行。所有试剂需在有效期内使用，不同批次的试剂不得混用。操作时需戴手套、口罩，避免试剂接触皮肤和黏膜。TMB底物溶液有潜在致癌性，终止液为强酸，操作时需小心，若不慎接触，立即用大量清水冲洗。实验结束后，废弃物应按照生物安全规定处理。【标准品稀释方法】1. 高浓度标准品（如32 ng/mL）为母液，无需稀释。2. 取50μL 32 ng/mL标准品加入50μL样品稀释液中，混匀，得到16 ng/mL标准品。3. 取50μL 16 ng/mL标准品加入50μL样品稀释液中，混匀，得到8 ng/mL标准品。4. 依次类推，稀释得到4 ng/mL、2 ng/mL标准品。5. 0 ng/mL标准品即为样品稀释液。【东升国际实验服务代测】ELISA实验代测ELISA（酶联免疫吸附实验）代测是科研和临床检测中＊常用的外包服务之一，基于抗原抗体特异性结合原理，可对生物样本中的微量物质进行定量或定性检测。一、按检测靶标类型分类1. 细胞因子与趋化因子类这是科研中需求量＊大的代测类别，主要用于免疫、炎症、肿瘤、心血管等研究白细胞介素家族：IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12、IL-17、IL-23 等干扰素家族：IFN-α、IFN-β、IFN-γ肿瘤坏死因子家族：TNF-α、TNF-β、LTA趋化因子家族：CCL2 (MCP-1)、CCL5 (RANTES)、CXCL8 (IL-8)、CXCL10 (IP-10)生长因子家族：EGF、VEGF、FGF、PDGF、TGF-β、NGF、IGF-12. 炎症与免疫相关标志物急性期反应蛋白：CRP、SAA、PCT、纤维蛋白原补体系统：C3、C4、C5a、C1q免疫球蛋白：IgG、IgA、IgM、IgE、IgD 及各亚型免疫细胞表面标志物：sCD4、sCD8、sCD14、sCD1633. 激素与内分泌相关垂体激素：FSH、LH、TSH、GH、PRL、ACTH甲状腺激素：T3、T4、FT3、FT4、TSH性激素：雌二醇 (E2)、孕酮 (P)、睾酮 (T)、雌酮、脱氢表雄酮代谢激素：胰岛素、胰高血糖素、瘦素 (Leptin)、脂联素 (Adiponectin)、抵抗素应激激素：皮质醇、肾上腺素、去甲肾上腺素4. 肿瘤标志物广谱肿瘤标志物：CEA、AFP、CA125、CA19-9、CA15-3、CA72-4器官特异性标志物：PSA (前列腺)、NSE (神经内分泌)、CYFRA21-1 (肺癌)、SCC (鳞状细胞癌)肿瘤相关蛋白：MMP-2、MMP-9、TIMP-1、VEGF、EGFR5. 自身抗体类抗核抗体谱：ANA、抗 ds-DNA、抗 Sm、抗 SSA、抗 SSB类风湿相关：RF、抗 CCP、抗角蛋白抗体血管炎相关：ANCA (c-ANCA、p-ANCA)、抗内皮细胞抗体其他自身抗体：抗甲状腺抗体 (TPOAb、TgAb)、抗胰岛素抗体、抗磷脂抗体6. 心血管疾病相关标志物心肌损伤标志物：cTnI、cTnT、CK-MB、Myoglobin心功能标志物：BNP、NT-proBNP动脉粥样硬化标志物：ox-LDL、Lp-PLA2、hs-CRP、同型半胱氨酸凝血与纤溶：D - 二聚体、FDP、PAI-1、t-PA7. 神经科学相关神经递质：5 - 羟色胺、多巴胺、去甲肾上腺素、乙酰胆碱、γ- 氨基丁酸神经退行性标志物：Aβ1-40、Aβ1-42、Tau 蛋白、磷酸化 Tau 蛋白神经炎症标志物：GFAP、S100B、NSE、MBP8. 其他常见靶标代谢物：葡萄糖、胆固醇、甘油三酯、尿酸、肌酐病原体抗原 / 抗体：乙肝五项、丙肝抗体、梅毒抗体、HIV 抗体、新冠病毒抗原 / 抗体药物浓度：抗生素、化疗药物、免疫抑制剂血药浓度qPCR实验代测实验四步走：1. 提取RNA → 记得防RNase污染！用Trizol＊稳2.逆转录 → 把RNA变成cDNA，这是关键一步3.上机运行 → 探针法更特异，染料法更便宜4.数据分析 → 用 2^(-ΔΔCt) 公式算相对表达量！ 血泪注意事项：引物Tm值＊好在60-64℃哦！染料法(如SYBR Green)一定要看熔解曲线，排除非特异性扩增！基线和阈值设置别乱调～所有操作都要防核酸酶污染！
微生物（Microorganism）磷酸葡萄糖变位酶（PGM）ELISA检测试剂盒【产品货号】DM-QT46477【包装规格】48/96T【用途】本试剂盒用于体外定量检测[样本类型，如：人血清、血浆、组织匀浆等]中的含量。仅供科研使用，不用于临床诊断。【检测原理】试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被检测指标抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成＊终的黄色。颜色的深浅和样品中的检测指标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。1 将抗体包被在酶标板底部，加入待测抗原2 加入酶标二抗放大信号3 捕获抗体和检测抗体分别结合抗原的不同表位，形成“抗体-抗原-抗体”的三明治结构4 加入底物5 酶催化底物显色，吸光度与抗原浓度成正比，适用于大分子抗原的定量检测，如细胞因子、蛋白质等【主要组成成分】组分名称规格数量酶标板96孔（包被抗体）1块标准品[浓度，如：0 ng/mL, 2 ng/mL, 4 ng/mL, 8 ng/mL, 16 ng/mL, 32 ng/mL]6瓶酶标记抗体10mL1瓶底物溶液（TMB）10mL1瓶终止液（2M H₂SO₄）10mL1瓶浓缩洗涤液（20×）50mL1瓶样品稀释液30mL1瓶说明书-1份【储存条件及有效期】试剂盒未开封时，于2-8℃避光保存，有效期为6个月。酶标板需密封保存于2-8℃，避免受潮。【需要准备的器材和试剂】1. 酶标仪（450nm）2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱【操作步骤】1. 试剂准备浓缩洗涤液：用蒸馏水或去离子水按1:20稀释（如5mL浓缩洗涤液+95mL水），充分混匀。稀释后的洗涤液在2-8℃可保存1周。标准品：根据说明书要求，用样品稀释液将标准品进行梯度稀释（具体稀释方法见说明书附录）。酶标记抗体：使用前需室温平衡30分钟，若有沉淀，可轻轻混匀。2. 样本处理按照常规方法采集和处理[样本类型]，具体处理步骤如下：血清：全血样本室温静置30分钟，3000rpm离心10分钟，取上清液。血浆：使用抗凝管采集血液，3000rpm离心10分钟，取上清液。组织匀浆：取适量组织，按1:9比例加入PBS（pH7.4），冰浴匀浆，3000rpm离心10分钟，取上清液。样本需在-20℃保存，避免反复冻融，检测前需室温解冻并充分混匀，如有沉淀需再次离心。3.加样将酶标板从铝箔袋中取出，平衡至室温。设标准品孔、样本孔和空白孔。空白孔加50μL样品稀释液，标准品孔分别加50μL不同浓度的标准品，样本孔加50μL待测样本。轻轻震荡混匀，37℃孵育30分钟。4. 洗涤弃去孔内液体，拍干。每孔加入200μL稀释后的洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。5. 加酶标记抗体除空白孔外，每孔加入50μL酶标记抗体。轻轻震荡混匀，37℃孵育30分钟。6. 洗涤同步骤4，洗涤5次。7. 显色每孔加入50μL底物溶液（TMB），轻轻震荡混匀，37℃避光孵育15分钟。8. 终止每孔加入50μL终止液，轻轻震荡混匀，此时蓝色立即变为黄色。9. 测定在终止反应后10分钟内，用酶标仪在450nm波长处测定各孔的吸光度（OD值）。【结果计算】以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘制标准曲线，或使用酶标仪自带软件进行曲线拟合。根据样品的OD值，从标准曲线上查出相应的[检测项目名称]浓度。标准曲线绘制示例：标准品浓度（ng/mL）：0, 2, 4, 8, 16, 32对应的OD值：[示例值，如：0.100, 0.250, 0.480, 0.850, 1.400, 2.100]建议采用四参数 logistic 曲线（4-PL）拟合，相关系数R²应≥0.99。【检测方法的局限性】本试剂盒仅供科研使用，结果不能作为临床诊断的唯一依据。样本处理不当可能导致结果偏差，应严格按照说明书操作。高浓度样本可能存在hook效应，建议对OD值异常高的样本进行适当稀释后重新检测。【注意事项】实验前请仔细阅读说明书，严格按照操作步骤进行。所有试剂需在有效期内使用，不同批次的试剂不得混用。操作时需戴手套、口罩，避免试剂接触皮肤和黏膜。TMB底物溶液有潜在致癌性，终止液为强酸，操作时需小心，若不慎接触，立即用大量清水冲洗。实验结束后，废弃物应按照生物安全规定处理。【标准品稀释方法】1. 高浓度标准品（如32 ng/mL）为母液，无需稀释。2. 取50μL 32 ng/mL标准品加入50μL样品稀释液中，混匀，得到16 ng/mL标准品。3. 取50μL 16 ng/mL标准品加入50μL样品稀释液中，混匀，得到8 ng/mL标准品。4. 依次类推，稀释得到4 ng/mL、2 ng/mL标准品。5. 0 ng/mL标准品即为样品稀释液。【东升国际实验服务代测】ELISA实验代测ELISA（酶联免疫吸附实验）代测是科研和临床检测中＊常用的外包服务之一，基于抗原抗体特异性结合原理，可对生物样本中的微量物质进行定量或定性检测。一、按检测靶标类型分类1. 细胞因子与趋化因子类这是科研中需求量＊大的代测类别，主要用于免疫、炎症、肿瘤、心血管等研究白细胞介素家族：IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12、IL-17、IL-23 等干扰素家族：IFN-α、IFN-β、IFN-γ肿瘤坏死因子家族：TNF-α、TNF-β、LTA趋化因子家族：CCL2 (MCP-1)、CCL5 (RANTES)、CXCL8 (IL-8)、CXCL10 (IP-10)生长因子家族：EGF、VEGF、FGF、PDGF、TGF-β、NGF、IGF-12. 炎症与免疫相关标志物急性期反应蛋白：CRP、SAA、PCT、纤维蛋白原补体系统：C3、C4、C5a、C1q免疫球蛋白：IgG、IgA、IgM、IgE、IgD 及各亚型免疫细胞表面标志物：sCD4、sCD8、sCD14、sCD1633. 激素与内分泌相关垂体激素：FSH、LH、TSH、GH、PRL、ACTH甲状腺激素：T3、T4、FT3、FT4、TSH性激素：雌二醇 (E2)、孕酮 (P)、睾酮 (T)、雌酮、脱氢表雄酮代谢激素：胰岛素、胰高血糖素、瘦素 (Leptin)、脂联素 (Adiponectin)、抵抗素应激激素：皮质醇、肾上腺素、去甲肾上腺素4. 肿瘤标志物广谱肿瘤标志物：CEA、AFP、CA125、CA19-9、CA15-3、CA72-4器官特异性标志物：PSA (前列腺)、NSE (神经内分泌)、CYFRA21-1 (肺癌)、SCC (鳞状细胞癌)肿瘤相关蛋白：MMP-2、MMP-9、TIMP-1、VEGF、EGFR5. 自身抗体类抗核抗体谱：ANA、抗 ds-DNA、抗 Sm、抗 SSA、抗 SSB类风湿相关：RF、抗 CCP、抗角蛋白抗体血管炎相关：ANCA (c-ANCA、p-ANCA)、抗内皮细胞抗体其他自身抗体：抗甲状腺抗体 (TPOAb、TgAb)、抗胰岛素抗体、抗磷脂抗体6. 心血管疾病相关标志物心肌损伤标志物：cTnI、cTnT、CK-MB、Myoglobin心功能标志物：BNP、NT-proBNP动脉粥样硬化标志物：ox-LDL、Lp-PLA2、hs-CRP、同型半胱氨酸凝血与纤溶：D - 二聚体、FDP、PAI-1、t-PA7. 神经科学相关神经递质：5 - 羟色胺、多巴胺、去甲肾上腺素、乙酰胆碱、γ- 氨基丁酸神经退行性标志物：Aβ1-40、Aβ1-42、Tau 蛋白、磷酸化 Tau 蛋白神经炎症标志物：GFAP、S100B、NSE、MBP8. 其他常见靶标代谢物：葡萄糖、胆固醇、甘油三酯、尿酸、肌酐病原体抗原 / 抗体：乙肝五项、丙肝抗体、梅毒抗体、HIV 抗体、新冠病毒抗原 / 抗体药物浓度：抗生素、化疗药物、免疫抑制剂血药浓度qPCR实验代测实验四步走：1. 提取RNA → 记得防RNase污染！用Trizol＊稳2.逆转录 → 把RNA变成cDNA，这是关键一步3.上机运行 → 探针法更特异，染料法更便宜4.数据分析 → 用 2^(-ΔΔCt) 公式算相对表达量！ 血泪注意事项：引物Tm值＊好在60-64℃哦！染料法(如SYBR Green)一定要看熔解曲线，排除非特异性扩增！基线和阈值设置别乱调～所有操作都要防核酸酶污染！
鹅（Goose）甘油三酯（TG）ELISA检测试剂盒本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被甘油三酯（TG）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成＊终的黄色。颜色的深浅和样品中的甘油三酯（TG）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。样品收集、处理及保存方法1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品1. 酶标仪（450nm）2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱操作注意事项1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，＊终结果乘以5才是样本实际浓度。4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5. 所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、0.6、1.2、2.4、4.8、9.6mmol/L试剂的准备 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法1. 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。2. 自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。操作步骤1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；3. 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断 绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。 试剂盒性能1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。2. 灵敏度：＊低检测浓度小于0.1 mmol/L。3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。6. 有效期：6个月免责声明1. 试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。2. 严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。
鹅（Goose）总胆固醇（TC）ELISA检测试剂盒本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被总胆固醇（TC）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成＊终的黄色。颜色的深浅和样品中的总胆固醇（TC）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。样品收集、处理及保存方法1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品1. 酶标仪（450nm）2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱操作注意事项1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，＊终结果乘以5才是样本实际浓度。4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5. 所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、0.75、1.5、3、6、12 mmol/L试剂的准备 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法1. 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。2. 自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。操作步骤1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；3. 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。 4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断 绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。 试剂盒性能1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。2. 灵敏度：＊低检测浓度小于0.1 mmol/L。3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。6. 有效期：6个月免责声明1. 试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。2. 严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。
鹅（Goose）二肽酶（DPEP）ELISA检测试剂盒本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被二肽酶（DPEP）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成＊终的黄色。颜色的深浅和样品中的二肽酶（DPEP）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品活性。样品收集、处理及保存方法1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品1. 酶标仪（450nm）2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱操作注意事项1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，＊终结果乘以5才是样本实际浓度。4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5. 所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、20、40、80、160、320 U/mL试剂的准备 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法1. 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。2. 自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。操作步骤1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；3. 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断 绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。 试剂盒性能1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。2. 灵敏度：＊低检测浓度小于1.0 U/mL。3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。6. 有效期：6个月免责声明1. 试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。2. 严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。 FOR RESEARCH USE ONLY. NOT FOR USE IN DIAGNOSTIC PROCEDURES. Goose DPEP ELISA Kit instruction Intended useThis DPEP ELISA kit is intended Laboratory for Research use only and is not for use in diagnostic or therapeutic procedures.The Stop Solution changes the color from blue to yellow and the intensity of the color is measured at 450 nm using a spectrophotometer. In order to measure the concentration of DPEP in the sample, this DPEP ELISA Kit includes a set of calibration standards. The calibration standards are assayed at the same time as the samples and allow the operator to produce a standard curve of Optical Density versus DPEP concentration. The concentration of DPEP in the samples is then determined by comparing the O.D. of the samples to the standard curve.Sample collection and storagesSerum - Use a serum separator tube and allow samples to clot for 30 minutes before centrifugation for 10 minutes at approximately 3000×g. Remove serum and assay immediately or aliquot and store samples at -20℃ or -80℃.Avoid repeated freeze-thaw cyclesPlasma - Collect plasma using EDTA or heparin as an anticoagulant. Centrifuge samples for 30 minutes at 3000×g at 2-8℃ within 30 minutes of collection. Store samples at -20℃or -80℃. Avoid repeated freeze-thaw cycles.Cell culture supernates and other biological fluids - Remove particulates by centrifugation and assay immediately or aliquot and store samples at -20℃or -80℃. Avoid repeated freeze-thaw cycles.Note: The samples shoule be centrifugated dequately and no hemolysis or granule was allowed.Materials required but not supplied1. Standard microplate reader(450nm)2. Precision pipettes and Disposable pipette tips.3. 37 ℃ incubatorPrecautions1. Do not substitute reagents from one kit to another. Standard, conjugate and microplates are matched for optimal performance. Use only the reagents supplied by manufacturer.2. Do not remove microplate from the storage bag until needed. Unused strips should be stored at 2-8°C in their pouch with the desiccant provided.3. Mix all reagents before using.Remove all kit reagents from refrigerator and allow them to reach room temperature ( 20-25°C)Materials suppliedName96 determinations48 determinationsMicroelisa stripplate12*8strips12*4stripsStandard0.3ml*6tubes0.3ml*6tubesSample Diluent6.0ml3.0mlHRP-Conjugate reagent10.0ml5.0ml20X Wash solution25ml15mlChromogen Solution A6.0ml3.0mlChromogen Solution B6.0ml3.0mlStop Solution6.0ml3.0mlClosure plate membrane22User manual11Sealed bags11Note: Standard (S0 → S5) concentration was followed by:0,20,40,80,160,320 U/mlReagent preparation20×wash solution:Dilute with Distilled or deionized water 1:20.Assay procedure1. Prepare all reagents before starting assay procedure. It is recommended that all Standards and Samples be added in duplicate to the Microelisa Stripplate.2. Add standard: Set Standard wells, testing sample wells. Add standard 50μl to standard well.3. Add Sample: Add testing sample 10μl then add Sample Diluent 40μl to testing sample well; Blank well doesn’t add anyting.4. Add 100μl of HRP-conjugate reagent to each well, cover with an adhesive strip and incubate for 60 minutes at 37°C. 5. Aspirate each well and wash, repeating the process four times for a total of five washes. Wash by filling each well with Wash Solution (400μl) using a squirt bottle, manifold dispenser or autowasher. Complete removal of liquid at each step is essential to good performance. After the last wash, remove any remaining Wash Solution by aspirating or decanting. Invert the plate and blot it against clean paper towels.6. Add chromogen solution A 50μl and chromogen solution B 50μl to each well. Gently mix and incubate for 15 minutes at 37°C. Protect from light.7. Add 50μl Stop Solution to each well. The color in the wells should change from blue to yellow. If the color in the wells is green or the color change does not appear uniform, gently tap the plate to ensure thorough mixing.8. Read the Optical Density (O.D.) at 450 nm using a microtiter plate reader within 15 minutes.Calculation of results1. This standard curve is used to determine the amount in an unknown sample. The standard curve is generated by plotting the average O.D. (450 nm) obtained for each of the six standard concentrations on the vertical (Y) axis versus the corresponding concentration on the horizontal (X) axis. 2. First, calculate the mean O.D. value for each standard and sample. All O.D. values, are subtracted by the mean value of the zero standard before result interpretation. Construct the standard curve using graph paper or statistical software. 3. To determine the amount in each sample, first locate the O.D. value on the Y-axis and extend a horizontal line to the standard curve. At the point of intersection, draw a vertical line to the X-axis and read the corresponding concentration. 4. Any variation in operator, pipetting and washing technique, incubation time or temperature, and kit age can cause variation in result. Each user should obtain their own standard curve.5. The sensitivity by this assay is 1.0 U/ml6. Standard curve Storage： 2-8℃.validity： six months. FOR RESEARCH USE ONLY; NOT FOR THERAPEUTIC OR DIAGNOSTIC APPLICATIONS! PLEASE READ THROUGH ENTIRE PROCEDURE BEFORE BEGINNING!
鹅（Goose）氨肽酶（APs）ELISA检测试剂盒本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被氨肽酶（APs）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成＊终的黄色。颜色的深浅和样品中的氨肽酶（APs）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品活性。样品收集、处理及保存方法1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品1. 酶标仪（450nm）2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱操作注意事项1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，＊终结果乘以5才是样本实际浓度。4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5. 所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、4、8、16、32、64 U/L试剂的准备 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法1. 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。2. 自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。操作步骤1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；3. 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断 绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。 试剂盒性能1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。2. 灵敏度：＊低检测浓度小于1.0 U/L。3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。6. 有效期：6个月免责声明1. 试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。2. 严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。
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